產(chǎn)品名稱:正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1
形態(tài)特性:成肌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
特征特性:肌成纖維基質(zhì)細(xì)胞株,WPMY-1,與RWPE-1CA-lls(ATCCCRL-11609)一樣,來(lái)源于同一張**前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質(zhì)細(xì)胞。通過(guò)一個(gè)pRSTV質(zhì)料結(jié)構(gòu),用SV40大T抗原對(duì)基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行永生化。WPMY-1細(xì)胞,與RWPE-1細(xì)胞及其它上皮細(xì)胞衍生株一樣,屬于來(lái)源于同一個(gè)前列腺的一系列細(xì)胞株。由于它們來(lái)源于同一個(gè)前列腺的周圍區(qū)域,WPMY-1細(xì)胞株對(duì)于研究分泌和基質(zhì)與上皮細(xì)胞相互作用尤其有用。
培養(yǎng)條件:DMEM(高糖)+10%FBS
傳代方法:消化CQ-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號(hào)
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WPMY-1細(xì)胞
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T25
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FS-X3398
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公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
氧化 99.9% metals basis,200目Anti-CIDEB/FITC 熒光素標(biāo)記CIDEB抗體IgG雞內(nèi)脂素(VF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
氧化鎵 99.99% metals basisAnti-C-jun/AP-1 /FITC 熒光素標(biāo)記原癌因蛋白/活化蛋白1抗體IgG雞蛋白聚糖4(PRG4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
氧化鎵 99.999% metals basis
Anti-phospho-c-Jun (Ser73) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化原癌因c-Jun抗體IgG雞生長(zhǎng)分化因子1(GDF1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
羧乙鍺倍半氧化物(GE 132) 99.95%Anti-CK2/FITC 熒光素標(biāo)記酪氨激酶2抗體IgG雞巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
鍺 SPAnti-CK3/FITC 熒光素標(biāo)記角蛋白3抗體IgG雞腫瘤相關(guān)抗原(TAA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
鍺粉 99.999% metals basis,1mmAnti-CK4/FITC 熒光素標(biāo)記角蛋白4抗體IgG雞組織多肽特異性抗原(TPS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
鍺 Φ5mm 高2.5mm 錐形體 Ge≥99.999%Anti-CK5/FITC 熒光素標(biāo)記角蛋白5抗體IgG雞TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子1(TAF1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
鍺 Φ7mm 高2.5mn 錐形體 Ge≥99.999%Anti-PCNA(phosphos Dyr211)/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、小鼠、大鼠、牛、兔、羊、雞化增殖核抗原抗體IgG雞生長(zhǎng)分化因子15(GDF15)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
鍺 4mm高(厚)1mm 圓柱體Ge≥99.999% Anti-CK5/6 /FITC 熒光素標(biāo)記角蛋白5/6抗體IgG雞精氨酰tRNA合成酶(RARS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
鍺 Φ7mm高(厚)2.5mm(厚)5mm 圓柱體Ge≥99.999%Anti-CK7/FITC 熒光素標(biāo)記角蛋白7抗體IgG雞TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子2(TAF2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
鍺 5mm×5mm 厚2mm 正方形 Ge≥99.999%Anti-CK7/FITC 熒光素標(biāo)記抗角蛋白7抗體(大、小鼠)IgG雞神經(jīng)特異性烯化酶(NSE)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
鍺 5mm 圓珠 中間穿孔 Ge≥99.999% Anti-CK10/FITC 熒光素標(biāo)記角蛋白10抗體IgG雞趨化因子CC受體樣蛋白1(CCRL1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
鍺粒 99.999% metals basis,2000目Anti-CK10/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記角蛋白10抗體IgG雞Ⅲ型膠原(COL3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
鍺粒 99.99% metals basis,1mmAnti-CK14/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗角蛋白14抗體IgG雞生長(zhǎng)誘導(dǎo)跨膜蛋白(GHITM)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
氧化鍺 SPAnti-CK15/FITC 熒光素標(biāo)記角蛋白15抗體IgG雞顆粒酶K(GZMK)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
WPMY-1細(xì)胞尿酶Elisa試劑盒化p21激活激酶4多肽抗原IL-8/CXCL8 白介素8抗體
色氨轉(zhuǎn)氨酶Elisa試劑盒激活激酶PAK7/PAK5抗原IL-8/CXCL8 白介素8抗體
色氨轉(zhuǎn)氨酶Elisa試劑盒蛋白酶激活受體-1抗原IL-7Ra/CD127 白介素-7受體a抗體
嗜環(huán)蛋白親環(huán)素AElisa試劑盒蛋白酶激活受體-2抗原IL-7 白介素7抗體
焦酶Elisa試劑盒蛋白酶活化受體4/前列腺凋亡反應(yīng)蛋白4抗原IL-6R Beta/CD130/gp130 白介素6受體β抗體IL-6Rβ
赤霉素12Elisa試劑盒多腺苷二多聚酶抗原(N端)IL-6R alpha 白介素6受體α抗體IL-6Rα
天冬酰合成酶Elisa試劑盒配對(duì)盒因8抗原IL-6 (NT) 白介素6抗體(N端)
生長(zhǎng)素Elisa試劑盒配對(duì)盒因9抗原IL-6 白介素6抗體
淀粉酶Elisa試劑盒P-鈣粘附分子抗原IL-6 白介素6抗體
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