實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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RWPE-2細胞
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T25
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FS-X3396
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產(chǎn)品名稱:正常前列腺上皮細胞;RWPE-2
形態(tài)特性:上皮細胞
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)條件:KM培養(yǎng)基
傳代方法:1:3傳代,2-3天傳一代。
公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
鎢 99.95%,12μmAnti-CDK9/FITC 熒光素標記周期素依賴性激酶9抗體IgG雞血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢粉 9.95%,<1.1μmAnti-Phospho-CDK9 (Thr186) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠化周期素依賴性激酶9抗體IgG雞質(zhì)衍生因子2(SDF-2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢絲 99.95%,1mm 直徑Anti-CD133/RBITC 紅色熒光素羅丹明 (RBITC)標記兔抗人、大、小鼠和果蠅CD133抗體IgG雞γ谷氨酰半胱氨合成酶(γ-ECS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢標準溶液 1000μg/mlAnti-CD46/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標記CD46膜輔蛋白抗體IgG雞戊糖素(PTD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢 3.5≤d<5.0,99.95%Anti-Cdkn1c/p57/Kip2 /FITC 熒光素標記周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體IgG雞黑色素瘤關(guān)聯(lián)ME20 (ME20M)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢 99.95%,0.5mm 直徑Anti-Phospho-p57 Kip2 (Thr310)/FITC 熒光素標記化周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體IgG雞狀旁腺(PTH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢 99.95%,0.25mm 直徑Anti-CDX2/FITC 熒光素標記尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體IgG雞骨成型蛋白15(BMP-15)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢 99.95%,1mm 直徑Anti-CEA /FITC 熒光素標記癌胚抗原抗體IgG雞腺苷脫氨酶(ADA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢 99.95%,0.1mm 直徑Anti-CEBP- Alpha /CLEBP Alpha /FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體IgG雞抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢 9.95%,50μm Anti-Phospho-C/EBPbeta (Ser105) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體IgG雞鋅結(jié)合α2-糖蛋白1(αZGP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢 99.95%,12μmAnti-Phospho-C/EBPalpha (Ser21) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體IgG雞胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢粉 99.98% metals basis,1-5μmAnti-Phospho-C/EBPalpha (Thr222/226) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體IgG雞成纖維生長因子受體3(FGFR3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢粉 9.95%,<1.1μmAnti-C/EBP Beta/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體IgG雞趨化因子CCL3樣蛋白1(CCL3L1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢 比表面積10-15m2/g,粒度20nm-100nm,99.9%Anti-Phospho-C/EBPbeta (Thr235) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體IgG雞前列腺素F2α(PGF2α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鎢 99.99% metals basisAnti-PBK/TOPK/FITC 熒光素標記PDZ連接激酶/T-LAK源蛋白激酶抗體IgG雞絲氨蛋白酶(PRSS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
RWPE-2細胞藻紅蛋白Elisa試劑盒胚胎干關(guān)鍵蛋白抗原Inhibin beta A/Activin A 抑制素βA抗體 Inhibin βA
藻藍蛋白Elisa試劑盒鳥氨脫羧酶抗原Inhibin Alpha 抑制素α抗體 Inhibin α
蘋果Elisa試劑盒小腸結(jié)腸炎耶爾森氏膜通道蛋白抗原ING1/p33 生長抑制因子因1抗體
雙酚AElisa試劑盒嗅球蛋白1多肽抗原Influenza A virus (Duck) 鴨流感病抗體
α-淀粉酶Elisa試劑盒增食欲素-A/欲A抗原INCA1 INCA1蛋白抗體
脫落合成酶Elisa試劑盒縮宮素受體Importin4/RanBP4 核蛋白4抗體(Ran結(jié)合蛋白4)
生長素合成酶Elisa試劑盒食欲素受體(多肽)Importin 9/RanBP9 核蛋白9抗體(Ran結(jié)合蛋白M)
脂酶DElisa試劑盒增殖潛能相關(guān)蛋白抗原IMPDH2 5'肌苷脫氫酶2抗體
長鏈脂肪Elisa試劑盒p19ARF抑癌因抗原IMPDH1 肌苷單脫氫酶1抗體
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。