實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

產(chǎn)品名稱：肺腺癌細(xì)胞；NCI-H1975
形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

特征特性：這株細(xì)胞于1988年七月建株。組織提供者是一位非吸煙人士。

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：消化CQ-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 
2-異氧乙 99%NGAL ELISA Kit  大鼠中性粒明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白兔脂肪酶H (LIPH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2-異 97%Hp-IgG ELISA Kit  大鼠幽門螺旋IgG兔α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(α-SCA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

1,3-茚滿二酮 97%ER ELISA Kit   大鼠雌受體兔膽囊收縮素/腸促胰酶肽B受體(CCKBR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

4- 98%Beta-DF ELISA Kit  大鼠β-防御素兔B瘤因子2(Bcl-2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

吲哚乙酯 97%D1R ELISA Kit  大鼠多巴D1受體兔S100鈣結(jié)合蛋白A13(S100A13 )酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

菊糖 BCADRA1A ELISA Kit   大鼠腎上腺素能a1A受體兔視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(PRB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異酯 98%CR ELISA Kit  大鼠鈣結(jié)合蛋白兔生長(zhǎng)誘導(dǎo)跨膜蛋白(GHITM)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

銥 99.90%,325目HABP ELISA Kit  大鼠透明質(zhì)結(jié)合蛋白兔孕/孕酮(Pg)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

5--2- 98%BMP-6 ELISA Kit  大鼠骨形成蛋白6兔胸腺依賴性抗原(TD-Ag)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

3-芐鹽鹽 97%大鼠因子ELISA Kit  大鼠因子兔黑色素瘤關(guān)聯(lián)硫軟骨素蛋白聚糖(MCSP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

硝銦水合物  99.999% metals basismALB ELISA Kit  大鼠微量蛋白兔脂肪去飽和酶2 (FADS2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

健那綠B BS, Dye content 65 %AcSDKP ELISA Kit  大鼠N-乙酰-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨兔抗神經(jīng)節(jié)苷脂M1抗體(Anti-GM1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

β-糖 含80%β-糖和20% α-糖PA-IgG/M/A ELISA Kit  大鼠抗血小板抗體IgG/M/A兔衰老關(guān)鍵蛋白5(FBLN5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鉛 99.99%,powderNTX)ELISA Kit  大鼠Ⅰ型膠原N末端肽兔泛素連接酶E3A (UBE3A)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

二氧化鉛 ACS, ≥97.0%HSP-27 ELISA Kit  大鼠熱休克蛋白27兔N-乙酰β-D-氨葡萄糖苷酶(NAGase)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
NCI-H1975細(xì)胞核糖核蛋白BElisa試劑盒Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGMSX1  MSH同源蛋白1樣蛋白抗體

鳥苷酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGMST4  絲氨/蘇氨蛋白激酶MST4抗體

類泛素蛋白Elisa試劑盒辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgGMST1  蛋白激酶MST抗體

非化酮脫氫酶Elisa試劑盒辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗水貂IgGMSS1  26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型7抗體

前膠原賴氨-1,2-酮戊二-5-雙加氧酶1Elisa試劑盒生物素標(biāo)記的兔抗水貂IgGMSR1/CD204  巨噬清道夫受體1/2/3抗體

血小板糖蛋白VElisa試劑盒Cy3標(biāo)記的兔抗水貂IgGMSK1/RPS6KA5  有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體

血小板衍化生長(zhǎng)因子DDElisa試劑盒Cy5標(biāo)記的兔抗水貂IgGmSin3A  同源轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白Sin3A抗體

激活素受體樣激酶1Elisa試劑盒Cy5.5標(biāo)記的兔抗水貂IgGMSH6  錯(cuò)配修復(fù)蛋白6抗體

四旋蛋白2Elisa試劑盒Cy7標(biāo)記的兔抗水貂IgGMSH3  錯(cuò)配修復(fù)蛋白3抗體
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

產(chǎn)品留言

標(biāo)題

聯(lián)系人

聯(lián)系電話

內(nèi)容

驗(yàn)證碼

點(diǎn)擊換一張

注：1.可以使用快捷鍵Alt+S或Ctrl+Enter發(fā)送信息!
2.如有必要,請(qǐng)您留下您的詳細(xì)聯(lián)系方式!