公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱：肝癌細(xì)胞；BEL-7404
形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

特征特性：用Northernblot方法，未能檢測(cè)到細(xì)胞中1.3kbLFIRE-1/HFREP-1mRNA的表達(dá)。

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS

傳代方法：消化CQ-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

4,7-二-1,10-菲啰啉 99%(CTX- I )ELISA Kit  大鼠Ⅰ型膠原C端肽兔趨化因子CXC配體16 (CXCL16)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

N,N'-二聯(lián) 98%(pIKB Alpha)ELISA Kit  大鼠化核因子κB抑制蛋白α兔質(zhì)裂解蛋白/質(zhì)溶素(MAT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

二氫尿嘧啶 99%(NF-κB)ELISA Kit  大鼠核因子κB兔蛋白激酶C-ζ(PKCζ)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

L-2,4-二氨丁 98+%(DC-SIGN/CD209)ELISA Kit  大鼠樹(shù)突狀表面特異性C型凝集素-間黏附分子3結(jié)合非整合素分子兔TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子2(TAF2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2,6-二-3-(三氟)吡啶 98%(P I NP)ELISA Kit  大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽兔蛋白激酶C-δ1(PKCδ1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

1,3-二四二硅氧烷 97%(ADAM9)ELISA Kit  大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9兔接觸蛋白3(CNTN3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2,5-二 98.0%大鼠c-fos ELISA Kit  大鼠c-fos兔補(bǔ)體因子8g(C8g)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

3,5-二芐 97%大鼠c-jun ELISA Kit   大鼠c-jun ELISA Kit兔小泛素相關(guān)修飾蛋白2 (SUMO2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2,6-二乙 98%sIL-6R ELISA Kit  大鼠可溶性白介素6受體兔T活化連接蛋白(LAT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2,5-二 97%PYD ELISA Kit  大鼠吡啶酚兔BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

3,4-二 98%BACE2 ELISA Kit  大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2兔葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2,6-二磺酰 97%BALP ELISA Kit  大鼠骨堿性酶兔錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

二硫代縮二脲 CPIL-32 ELISA Kit  大鼠白介素32兔血小板親和蛋白1(PKP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

(S)-1-(4-)乙 98%, ee 99+% PROGR ELISA kit   大鼠孕酮受體兔別孕烯酮 (AP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

1,4-二氧六環(huán) 無(wú)水級(jí),≥99.5%IL-21 ELISA Kit   大鼠白介素21兔核因子-κB亞p65(NF-κB p65)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
BEL-7404細(xì)胞色素C還原酶核心蛋白1Elisa試劑盒堿性酶（AP）標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈Myocardin  促血管平滑肌分化因子抗體

S亞硝硫Elisa試劑盒FITC標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈MYLK3  肌球蛋白輕鏈激酶3抗體

干生長(zhǎng)因子-BElisa試劑盒膠體金標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈MYLK2  肌球蛋白輕鏈激酶2抗體

微管關(guān)聯(lián)絲;蘇氨激酶2Elisa試劑盒Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈MYLIP/Idol  低密度脂蛋白受體的誘導(dǎo)降解蛋白抗體

谷氨脫氫酶Elisa試劑盒Cy5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈MYL9  肌球蛋白輕鏈9抗體

微管關(guān)聯(lián)絲;蘇氨激酶2Elisa試劑盒Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈MYL7  肌球蛋白輕鏈7抗體

彈性蛋白酶抑制劑Elisa試劑盒Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈MYL6  肌球蛋白輕鏈6抗體

胎蛋白異質(zhì)體Elisa試劑盒PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈MYL3/Myosin light chain 3  肌球蛋白輕鏈3抗??

PSD95Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈MYH9  肌球蛋白重鏈9抗體

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