實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；
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產品名稱
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規(guī)格
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貨號
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結直腸腺癌細胞；COLO320HSR
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T25
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FS-X3219
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生長特性：半貼壁生長
特征特性：該細胞1984年建系，源自一位33歲患有大腸腺癌男性經(jīng)5-fu**后的腹水。
培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS
傳代方法:1:2。3天內可長滿。
公司細胞現(xiàn)貨供應，質量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
S-(-)-吲哚啉-2-羧 99%OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白兔早期生長應答蛋白2(EGR2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
(2S,3aS,7aS)-2-羧八氫吲哚 98%MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit 人骨髓抑制因子1兔肌鈣蛋白I(Tn-I)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
2- 97%ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂聯(lián)素兔周期素依賴性激酶2(CDK2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
烯鈉 99%HIS(Human Histamine) ELISA KIT 人組兔富含半胱氨型性蛋白(SPARC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧乙 分析標準品Human Resistin ELISA KIT 人抵抗素兔氨氨肽酶(AAP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧乙 98%ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 人骨特異性堿性酶B兔核孔蛋白85kda(NUP85)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
CP，98.0%（劇品）OT/BGP(Human Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA kit 人骨鈣素/骨谷氨蛋白兔角蛋白19(CK-19/KRT19)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
AR，99.0%（劇品）sRANKL(Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand) ELISA Kit 人可溶性核因子κB受體活化因子配兔XI型膠原α1(COL11α1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
乙二 >99% (GC)1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit 人1,25二羥維生素D3兔抗凝血酶(AT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
蘇丹藍II 高純級，97%Human histon-H2b ELISA Kit 人組蛋白H2b兔雌誘導蛋白PS2 (EIPS2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
蘇丹藍II Biological stainOPG(Human Osteoprotegerin) ELISA KIT 人骨保護素兔化腺苷活化蛋白激酶(AMPK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
蘇丹藍II 分析標準品BMPR- II (Human Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體Ⅱ兔黑素瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
重膽堿 98%BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體1A兔骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氫 AR，99%BMP-4(Human Bone morphogenetic protein 4) ELISA Ki 人骨成型蛋白4兔孕酮受體(PGR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
銻 AR,99.5%BMP-2(Human Bone morphogenetic protein 2) ELISA Kit 人骨成型蛋白2兔蛋白激酶Cα相互作用蛋白α1(PICK1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
結直腸腺癌細胞；COLO320HSR序列相似家族19成員A5Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標記的羊抗人IgGPatched/PTCH Patched/PTCH抗體
肽脯氨順反異構酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標記的羊抗人IgGPASK/STK39 絲氨/蘇氨蛋白激酶39抗體
肽脯氨順反異構酶Elisa試劑盒PE-Cy5.5標記的羊抗人IgGPAS1C1 核纖層蛋白A相關結構蛋白1抗體
骨髓源性生長因子Elisa試劑盒PE-Cy7標記的羊抗人IgGParvalbumin 細小清蛋白抗體
EB病早期抗原Elisa試劑盒Cy3標記的羊抗人IgGPARP4 多腺苷二多聚酶4抗體/多聚ADP-核糖聚合酶4
EB病核心抗原Elisa試劑盒Cy5標記的羊抗人IgGPARP3 多腺苷二多聚酶3抗體/多聚ADP-核糖聚合酶3
賴氨特異性脫酶5AElisa試劑盒Cy5.5標記的羊抗人IgGPARP16 多腺苷二多聚酶16抗體
β-葡萄糖苷酶Elisa試劑盒PE-Cy3標記的羊抗人IgGPARP (N-Terminus) 多腺苷二多聚酶抗體(N端)
血清粘蛋白Elisa試劑盒PE-CY5標記的羊抗人IgGPARP 多腺苷二多聚酶抗體/多聚ADP-核糖聚合酶1
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
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