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技術(shù)文章

光學(xué)顯微鏡下的細胞

  
光學(xué)顯微鏡細胞化學(xué)是利用特異的化學(xué)或生化反應(yīng)在電鏡下對細胞的化學(xué)成份進行定性與定位分析的方法.電鏡細胞化學(xué)是在光鏡細胞化學(xué)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的。形態(tài)所不同的是，電鏡細胞化學(xué)反應(yīng)的結(jié)果必須在所研究的化學(xué)成份的部位引起電子密度的改變，形態(tài)這是由電鏡的成像原理所決定的。根據(jù)造成細胞中電子密度變化的原因、光學(xué)顯微鏡可將電鏡細胞化學(xué)方法分為二類:
    1.反應(yīng)產(chǎn)物是不溶解的并且是高電子密度的。光學(xué)顯微鏡例如在固定劑中加入草酸鈉，能將細胞內(nèi)的鈣離子變?yōu)椴菟徕}沉淀下來，并在電鏡下顯示為        高電子密度。
      用30寫甘油一0. 155M醋酸按(形態(tài)揮發(fā)性鹽)沖洗云母表面，光學(xué)顯微鏡吸干。在真空10-STorr, 1小時，除去甘油、噴碳。
      漂浮出碳膜和吸附的質(zhì)膜在雙蒸水表面.
      用載網(wǎng)撈膜，吸干.光學(xué)顯微鏡用2%醋酸鈾，或相酸按、形態(tài)磷鎢酸鈉一滴滴在石蠟板表面，將載網(wǎng)傾斜鏟起負染液滴。
      尼康顯微鏡用濾紙吸干多余的染液，室溫干燥.此法可觀察質(zhì)膜原位骨架，形態(tài)也可做細胞骨架膠體金或鐵蛋白標(biāo)記。
    2.反應(yīng)產(chǎn)物是不溶解的，光學(xué)顯微鏡經(jīng)過電鏡樣品制備中的常規(guī)餓酸固定可變?yōu)楦唠娮用芏鹊?。例如DAB可被細胞色素氧化酶所氧化而形成沉淀，并可被俄化，光學(xué)顯微鏡用于顯示酶所在部位。