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技術(shù)文章

親和色譜柱的一般流程
      親和色譜柱也稱為親和層析，是一種利用固定相的結(jié)合特性來(lái)分離分子的色譜方法。親和色譜柱在凝膠過(guò)濾色譜柱上連接與待分離的物質(zhì)有一定結(jié)合能力的分子，并且它們的結(jié)合是可逆的，在改變流動(dòng)相條件時(shí)二者還能相互分離。親和色譜可以用來(lái)從混合物中純化或濃縮某一分子，也可以用來(lái)去處或減少混合物中某一分子的含量。

      將一對(duì)能可逆結(jié)合和解離生物分子的一方作為配基（也稱為配體），與具有大孔徑、親水性的固相載體相偶聯(lián)、制成專一的親和吸附劑，再用此親和吸附劑填充色譜柱，當(dāng)含有被分離物質(zhì)的混合物隨著流動(dòng)相流經(jīng)親和色譜柱時(shí)，親和吸附劑上的配基就有選擇地吸附能與其結(jié)合的物質(zhì)，而其他的蛋白質(zhì)及雜質(zhì)不被吸附，從色譜柱中流出，使用適當(dāng)?shù)木彌_液使被分離物質(zhì)與配基解吸附，即可獲得純化的目的產(chǎn)物。

一般流程

      親和色譜柱分離的通常是混合在溶液中的物質(zhì)，比如細(xì)胞內(nèi)容物、培養(yǎng)基或血漿等。待分離的分子在通過(guò)色譜柱時(shí)被固定相或介質(zhì)上的基團(tuán)捕獲，而溶液中其他的物質(zhì)可以順利通過(guò)色譜柱。然后把固態(tài)的基質(zhì)取出后洗脫，目標(biāo)分子即刻被洗脫下來(lái)。如果分離的目的是去除溶液中某種分子，那么只要分子能與介質(zhì)結(jié)合即可，可以不必進(jìn)行洗脫（這里有沒(méi)有什么問(wèn)題呢？如果不進(jìn)行洗脫的話，柱子不能再生，沒(méi)有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值吧，柱子多貴）。

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