反射或落射(EPI)照明普遍用于生物顯微鏡的螢光激發(fā)應(yīng)用。然而大多數(shù)應(yīng)用于教育和醫(yī)療領(lǐng)域的生物顯微鏡都不配備有落射螢光照明。即使在很多的**的生物顯微鏡中，落射照明仍屬于昂貴的選項(xiàng)。為了使落射螢光照明在大多數(shù)顯微鏡上成為可能，可以在幾乎所有 顯微鏡上使用一種廉價(jià)的照明而無須對(duì)顯微鏡作任何改變。
貫穿鏡筒式(TET)落射(EPI)照明是由Might ex Systems開發(fā)并申請(qǐng)**的顯微鏡照明方案。TET-EPI 照明把光從典型雙筒顯微鏡的一個(gè)鏡筒射出。光穿過顯 微鏡物鏡照射到樣品上，與傳統(tǒng)的落射照明設(shè)置一樣。 TET-EPI照明能像適應(yīng)于普通物鏡一樣適應(yīng)于眼球。 圖像可以通過另一個(gè)鏡筒或者照相鏡筒來觀察。同樣的， TE-EPI照明光源也可以插入到照相鏡筒中。在本例中，如果顯微鏡在照相鏡筒和目鏡筒之間配備有光束分離器的話，那么圖像從兩個(gè)鏡筒中都可以看到。
特點(diǎn)
??低成本螢光配件
??幾乎使用于所有雙筒顯微鏡
??無須改變顯微鏡
??無須校正
??長(zhǎng)壽命的LED照明
??圖像亮度隨著目標(biāo)放大而增 加
??還可以通過光纖電纜使用弧 光及激光
應(yīng)用
??螢光顯微鏡
該系統(tǒng)圖(圖1)說明了一個(gè)典型的配備有TET落射照明顯微鏡。光源是一個(gè)高功率的單色LED光源。在 LED后面配置了聚光系統(tǒng)后就可以使得LED發(fā)射區(qū)域被成像在顯微鏡目鏡的出射口，在整個(gè)視場(chǎng)區(qū)域形成 均勻的柯勒照明系統(tǒng)。 來自LED光源的光再經(jīng)由刺激濾光片過濾，該濾光片的帶寬從幾個(gè)nm到幾十個(gè) nm。可以有各種不同的可見光波長(zhǎng)和濾光片供選擇。由于和傳統(tǒng)的刺激光源比如弧光和激光相比，LED的 亮度還很低，所以需要選用更大通過帶寬的刺激濾光片。
來自樣品的螢光穿過物鏡再經(jīng)由雙筒鏡頭內(nèi)的分束器到達(dá)另一目鏡管。位于成像通道上的濾光片攔截 下所有被樣品或者其它顯微鏡內(nèi)表面反射出來的刺激光。有一點(diǎn)很重要，那就是在刺激波長(zhǎng)范圍內(nèi)的濾光 片的光密度要大于6。有一個(gè)很方便的安裝濾光片的位置是在目鏡里面設(shè)計(jì)放十字架的位置。如果要使用 相機(jī)的話，那么還需要在相機(jī)或者其它成像通道上安放濾光片。
LED的一個(gè)獨(dú)特的地方是它們可以在每隔10nm的響應(yīng)時(shí)間內(nèi)隨時(shí)打開或關(guān)閉。快速的響應(yīng)時(shí)間使得LED在對(duì)螢光的時(shí)間分辨率研究中非常有用。LED光源也可以用脈沖模式在和相機(jī)連接后來記錄螢光圖 像。在脈沖模式下的LED峰值電流可以高于CW模式的數(shù)倍，產(chǎn)生更高的光功率以及更明亮的圖像。另 外，LED可以完全調(diào)光而很少改變波長(zhǎng)。
其它的一些光源如弧光燈、激光及白熾燈也可以通過光纖光纜連接到TET照明器上。