許多應(yīng)用(如光遺傳學(xué)、光激活、光刺激等)需要**的空間、時(shí)間和光譜控制方面的要 求。例如,對(duì)于光遺傳學(xué)來(lái)說(shuō),為了研究神經(jīng)元以及它們的回路特性,就需要通過(guò)**傳輸不 同顏色、高時(shí)空分辨率的光,來(lái)刺激/抑制所選擇的神經(jīng)元。除此之外,還可能需要單獨(dú)或同時(shí) 控制不同位置的神經(jīng)元活動(dòng)。Mightex的動(dòng)態(tài)空間照明器(DSI)就是專(zhuān)為這種應(yīng)用而設(shè)計(jì)的。
Polygon400 DSI集成了當(dāng)今*先進(jìn)的光空間調(diào)制器和高功率LED,該LED擁有獨(dú)特的集光 率保持技術(shù)能傳遞高強(qiáng)度的帶有衍射極限分辨率的照明圖案。還采用了德州儀器公司(Texas Instruments)的DLP光空間調(diào)制器來(lái)顯示用戶(hù)定義的圖案。在Polygon400內(nèi)部是一個(gè)獨(dú)特的光學(xué)系統(tǒng),該系統(tǒng)把來(lái)自LED光源的光傳遞到DLP平臺(tái)然后又通過(guò)顯微鏡到達(dá)樣本平面。這種系 統(tǒng)化的設(shè)計(jì)能使得在保持衍射極限圖像性能的前提下達(dá)到*大的光強(qiáng)度。
時(shí)間性能對(duì)許多使用Polygon400的應(yīng)用來(lái)說(shuō)是一個(gè)關(guān)鍵因素。在超過(guò)4,000 fps的刷新率 和快速切換LED的情況下, Mightex的Polygon400仍能夠以微秒級(jí)的精度來(lái)傳遞照明圖案。
用 戶(hù) 可 以 使用專(zhuān)用軟件來(lái) 生成照明圖案, 同時(shí)也可以控制 照 明 強(qiáng) 度 和 時(shí)間。該軟件也可 以把照明圖案與 顯微鏡上的數(shù)碼 相機(jī)所拍攝的圖 像進(jìn)行對(duì)準(zhǔn)。
MightexPolygon400的設(shè)計(jì)使之容易能插入到顯微鏡的無(wú)限遠(yuǎn)路徑。對(duì)倒立式顯微鏡來(lái)說(shuō),*好的插入點(diǎn)是在顯微鏡的后側(cè)端口,那里通常是擺放螢光樣品的地方。還需要一個(gè)濾光片用以把Polygon400光路折射進(jìn)顯微鏡。用于螢光觀測(cè)用的濾光片能很 好地起到作用。對(duì)正立式顯微鏡來(lái)說(shuō),我們提供一個(gè)光束結(jié)合器插入到雙筒/三筒鏡的下面。 位于光束結(jié)合器中的二向性濾光片或者鏡子把Polygon400光束傳遞到顯微鏡的光路中。
特點(diǎn)
? 可定義圖像定式
? *高達(dá)4000 幀/秒
? 416K 像素DLP平臺(tái)
? 可選波長(zhǎng)范圍寬
? 支持LED或弧光燈
? 有限衍射投射
? 高通量保持?jǐn)U展性設(shè)計(jì)
? 用于波長(zhǎng)快速切換的外部LED
控制器
? 可光纖或光導(dǎo)輸入
? 直觀的軟件操控照明定式的空
間性、時(shí)間性和光譜
應(yīng)用
? 光生物學(xué)
? 螢光成像
? 激光聚焦顯微鏡
選用“I”型Polygon400i時(shí),用戶(hù)可以從400nm到700nm的范圍內(nèi)指定*多三個(gè)LED作為內(nèi)置光源。
“E”型的Polygon400不使用內(nèi)部LED控制器,用戶(hù)可通過(guò)外部LED控制器直接控制內(nèi)部的LED。 內(nèi)部LED的正負(fù)極連到Polygon400后面的多針接頭上。
光導(dǎo)耦合“G”型(Polygon400g)也可以使用外部光源如LED、激光和弧汞燈。光導(dǎo)耦合型沒(méi)有內(nèi)置LED。
Polygon400g接受基本的3mm芯徑、套圈外徑5mm和套圈長(zhǎng)度15mm以上的光導(dǎo)。
“F”型Polygon400f與“G”型類(lèi)似,除了它使用光纖而不是光導(dǎo)作為輸入之外,其它都是一樣的。“F”型有一 個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的SMA接頭,為大多數(shù)激光光源所使用。
外部LED控制器可以提供內(nèi)部LED控制器不能支持的多種功能??梢杂懈鼜V的動(dòng)態(tài)范圍,更高的強(qiáng)度分辨率(>10
位),脈沖模式下更高的峰值電流以及更快的響應(yīng)時(shí)間(<10ns)。 使用外部LED控制器還能單獨(dú)控制LED的照明時(shí)間而不受控于微鏡陣列。例如,當(dāng)微鏡處于一個(gè)特定的位置時(shí),LED可
以被調(diào)制成所需的強(qiáng)度特性。另外,還可以通過(guò)Polygon400提供的外部觸發(fā)信號(hào),達(dá)到LED和微鏡之間的同步要求。
Mightex提供多種LED控制器可用于Polygon400的“E”、“G”和“F”型號(hào)。Polygon400的軟件也 包含了同步性能以支持BLS系列LED控制器。對(duì)第三方LED控制器而言,可通過(guò)觸發(fā)信號(hào)或Polygon400的SDK來(lái)實(shí)現(xiàn)同 步功能。
還可以使用其它端口比如顯微鏡上的照相機(jī)端口來(lái)使用Polygon400照明。如果您有特殊的需求,請(qǐng)發(fā)郵件到
amoytech@163.com /alinry_luo@163.com 或致電 。
用戶(hù)應(yīng)用實(shí)例
1. 在被感染的海馬神經(jīng)元上面,用Mightex的Polygon400對(duì)紫紅質(zhì)通道蛋白做光遺傳學(xué)刺激。
A)圖中藍(lán)線(xiàn)所示為在用Polygon400發(fā)出的藍(lán)光激活紫紅質(zhì)通道蛋白時(shí),使用膜片鉗技術(shù)記錄所產(chǎn) 生的電流。
B)活動(dòng)電極(上掃描線(xiàn))的激活和在電壓鉗狀態(tài)下的相關(guān)電流(下掃描線(xiàn))活動(dòng)電極可由Polygon發(fā)出的藍(lán)色光激發(fā)(0.5ms激發(fā)電流,激發(fā)光強(qiáng)度60%)
(Courtesy Dr. Hans van Hooft, University of Amsterdam )
2. 使用Mightex的Polygon400于光遺傳學(xué)刺激(神經(jīng)元的)突觸
在一轉(zhuǎn)基因老鼠的氨基丁酸能神經(jīng)元的光敏感通道中記錄得到的光誘發(fā)的抑制性后突觸電流
(IPSC)。
后突觸細(xì)胞是非氨基丁酸能(負(fù)光敏感通道)的,藍(lán)光刺激氨基丁酸能傳入光敏感通道。
藍(lán)線(xiàn)表示藍(lán)光照射的時(shí)間由Polygon發(fā)出的光斑1誘發(fā)了IPSC(抑制性后突觸電流),而光斑2沒(méi)有產(chǎn)生反應(yīng)。
(Courtesy Dr. Wataru Inoue, University of Western Ontario, Canada)
3. 蓋玻片上由光調(diào)節(jié)所產(chǎn)生的對(duì)蛋白質(zhì)之間相互作用的影響
http://www.mightexsystems.com/family_info.php? cPath=287_245_243&categories_id=243
這段視頻顯示了蛋白質(zhì)之間的相互作用被藍(lán)光所抑制的效果。
一部分是通過(guò)生物素表面試劑附著在蓋玻片上,而標(biāo)有“mCherry”的另一部分, 被固定在蓋玻片的暗處。Polygon400的圖案照明導(dǎo)致了標(biāo)有“mCherry”的蛋白質(zhì)部分 的可逆轉(zhuǎn)分解,并且在關(guān)閉藍(lán)光照射之后的幾分鐘之內(nèi)又重新結(jié)合起來(lái)。 Wittmann實(shí)驗(yàn)室正致力于研究開(kāi)發(fā)能用光照控制的細(xì)胞粘合表面技術(shù)。
(Courtesy Dr. Torsten Wittmann, University of California San Francisco)
4. 用Polygon急劇刺激來(lái)自于齒狀回中的轉(zhuǎn)基因光敏感通道的老鼠海馬切片
**個(gè)圖是用一個(gè)不斷增大的圓型圖案進(jìn)行反復(fù)刺激并導(dǎo)致不斷增強(qiáng)的 反應(yīng),直到一個(gè)反應(yīng)電壓產(chǎn)生為止。
**個(gè)圖是從30%到100%增加刺激的強(qiáng)度,并保持圖案尺寸不變。在 這里我們以10Hz100%強(qiáng)度驅(qū)動(dòng)細(xì)胞,可以看到在每一次去極后,刺激可以 足夠來(lái)驅(qū)動(dòng)激發(fā)電極兩次。
(Courtesy Dr. Geoffrey G. Murphy, Molecular & Behavioral Neuroscience Institute, Department of Molecular & Integrative Physiology, University of Michigan. Recordings made by Dr. Shannon Moore.)
5. 使用Polygon400對(duì)光敏感通道的光刺激
A)來(lái)自YFP光敏感通道老鼠的大腦切片,表明了在錐形神經(jīng)元的皮層L中的 反應(yīng)。
B)由填滿(mǎn)Alexa594的來(lái)自軀體感覺(jué)皮質(zhì)的L5錐狀神經(jīng)元允許產(chǎn)生神經(jīng)元隔 間的視覺(jué),而不用刺激光敏通道。 藍(lán)點(diǎn)顯示了在照明區(qū)域(藍(lán)LED470nm)的**樹(shù)突。標(biāo)記區(qū)域的擴(kuò)大表 示刺激了精致的樹(shù)突。
C)來(lái)自體細(xì)胞的電生理電流記錄(膜片鉗),與由藍(lán)光刺激的光敏感通道 一致。掃描線(xiàn)下面的數(shù)字與B中顯示的刺激點(diǎn)數(shù)字相關(guān)。
6. 用Polygon400在海馬神經(jīng)元的光敏通道中的光映射去極化處理
利用CamKII-ChR2-GFP慢性病毒轉(zhuǎn)變成E18斯普拉格-杜勒鼠神經(jīng) 元。軀體行為經(jīng)由全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄。每個(gè)區(qū)域由Polygon400以 100%功率和20ms曝光時(shí)間照射。洋紅圖案的強(qiáng)度代表用Polygon400的470nm刺激之前的即時(shí)靜態(tài)電位的去極處理。在這幅圖中,綠色代表 GFP信號(hào)的強(qiáng)度,黑色表示由膜片吸管回填的AlexaFluor594熒光強(qiáng)度。
(Courtesy Dr. Jacob T. Robinson, Departments of ECE and BioE, Rice Univer- sity, Houston, Texas. Data collected and prepared by Dan Murphy, Joel Dapello and
Ben Avants.)
- 溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買(mǎi)風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買(mǎi)前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
- 免責(zé)申明:以上內(nèi)容為注冊(cè)會(huì)員自行發(fā)布,若信息的真實(shí)性、合法性存在爭(zhēng)議,平臺(tái)將會(huì)監(jiān)督協(xié)助處理,歡迎舉報(bào)