農(nóng)殘儀檢測原理
農(nóng)殘速測儀檢測原理是采用酶抑制法,在一定條件下。有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制膽堿酯酶的活性,其抑制率與農(nóng)藥的濃度星正相關(guān)。在正常情況下,酶催化代謝產(chǎn)物水解。其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用分光光度計在410am處測定吸光度隨時間的變化值,計算出抑制率,通過抑制率的大小可以判斷樣品中是否有高劑量的有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。
2、農(nóng)殘速測方法
2.1試劑配制與保存
2.1.1緩沖液。用量筒量取500mL蒸餾水,先用少量(100一150 mL)的蒸餾水緩緩倒入放有緩沖 劑干粉的量杯中,用玻棒攪拌至完全溶解后將量筒中剩余的蒸餾水倒人量杯中充分?jǐn)嚢瑁〒u勻),待用。
2.1.2顯色劑。用刻度吸管吸5.2 mL緩沖液注入顯色劑瓶中,蓋上蓋搖勻,置于0—5℃環(huán)境中備用,切勿冷凍。
農(nóng)殘速測儀注意事項
?。?)定期校正調(diào)試、科學(xué)使用移液槍。選用250斗L和10斗L可調(diào)移液槍,將槍嘴先用清水沖洗再用純凈水沖洗,在電子天平上進(jìn)行吸液量校正。移液器使用時,必須遵循器具專用原則:吸取酶、顯色劑、底物的移液器貼上專用標(biāo)簽,移取試劑時一一對應(yīng)使用。
(2)檢測室溫度要控制在20—25℃,否則會影響酶的活性,影響結(jié)果刪。若完成對照測量后,儀器關(guān)機重啟,則需重新測量對照。進(jìn)行對照測量時,1 min后對照吸光度變化值應(yīng)在0.15以上,否則該酶試劑不能繼續(xù)使用。
(3)樣液制備過程中,浸提要充分,縮短時間對結(jié)果影響較大。酶試劑和樣品液或緩沖液的混合液靜置反應(yīng)時間為10 rain,反應(yīng)時間不同,結(jié)果不同。試劑從冰箱取出,先恢復(fù)至室溫,搖勻后再使用。酶、顯色劑和底物不能漏加或多加,否則對結(jié)果影響大。試劑使用時,必須遵循只出不進(jìn)原則:從酶、顯色劑、底物試劑瓶中移取出的試劑。不得返回原試劑瓶中,以免污染原試劑151。若被測比色杯中有氣泡產(chǎn)生。應(yīng)排除。以免影響測量結(jié)果。
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