根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見光譜的吸收，利用分光光度計(jì)在某一特定波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度，即可用公式計(jì)算出提取液中各色素的含量。葉綠素測(cè)定儀的工作原理根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見光譜的吸收，利用分光光度計(jì)在某一特定波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度。根據(jù)朗伯-比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比，即　　A＝αCL 式中：α比例常數(shù)。當(dāng)溶液濃度以百分濃度為單位，液層厚度為1cm時(shí)，α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)可通過(guò)測(cè)定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的吸光度而求得。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)，則此混合液在某一波長(zhǎng)下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長(zhǎng)下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。今欲測(cè)定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量，只需測(cè)定該提取液在三個(gè)特定波長(zhǎng)下的吸光度A，并根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測(cè)定葉綠素a、b時(shí)為了排除類胡蘿卜素的干擾，所用單色光的波長(zhǎng)選擇葉綠素在紅光區(qū)的大吸收峰。在400-700nm的光輻射（PAR）是光合作用所需的主要的能量。大部分葉片接受的光被吸收用來(lái)進(jìn)行光化學(xué)過(guò)程。然而，有一小部分的光從反應(yīng)中心以更長(zhǎng)波長(zhǎng)的光重新發(fā)散出去，這些被重新發(fā)散出的光稱為葉綠素?zé)晒狻y(cè)量很簡(jiǎn)單，先將葉片預(yù)黑暗處理一段時(shí)間，然后再在飽和光強(qiáng)下暴露短暫的時(shí)間，測(cè)量這段時(shí)間內(nèi)熒光強(qiáng)度隨時(shí)間的變化的動(dòng)力學(xué)感應(yīng)曲線。曲線的形狀和曲線上重要的瞬時(shí)值可以用來(lái)指示環(huán)境脅迫對(duì)光合器官的損傷。通常，有意義的參數(shù)是Fv/Fm，稱為光化學(xué)效率。

測(cè)量方法有兩種： 1.單手操作電池操作的OP-30P，是內(nèi)置分析探頭的葉綠素?zé)晒鈨x，這意味著操作儀器只需單手即可完成。輕巧的葉夾用來(lái)進(jìn)行在熒光測(cè)量前的暗適應(yīng)過(guò)程，這些無(wú)損型葉夾可以在非常多重植物樣品上使用。測(cè)量時(shí)，將分析探頭置于葉夾上，打開葉夾遮光片，將暗適應(yīng)后的部位暴露在由660nm固態(tài)光源的激發(fā)光下。誘導(dǎo)出的熒光由>700nm PIN光二極管測(cè)量，激發(fā)強(qiáng)度和實(shí)驗(yàn)間隔可由用戶自行選擇。新型選擇性檢測(cè)系統(tǒng)能比以往更地測(cè)定Fo和快速動(dòng)力學(xué)區(qū)域（熒光誘導(dǎo)曲線）。 2.快速田間測(cè)量顯示儀器設(shè)計(jì)用來(lái)快速測(cè)量顯示經(jīng)暗適應(yīng)后的Fv/Fm 比值。OP-30P是研究人員進(jìn)行基本植物脅迫分析的理想選擇。標(biāo)準(zhǔn)熒光參數(shù)顯示在控制單元的大面積液晶顯示屏上，內(nèi)部?jī)?nèi)存可以存儲(chǔ)5000組數(shù)據(jù)和32條實(shí)驗(yàn)跡線，時(shí)間和日期會(huì)自動(dòng)儲(chǔ)存。通過(guò)主機(jī)下方的單鍵可以對(duì)樣品進(jìn)行快速測(cè)量和數(shù)據(jù)存儲(chǔ)。熒光數(shù)據(jù)的精度可由非常高的取樣頻率（10-100000個(gè)點(diǎn)/秒）來(lái)確保。     

    測(cè)量參數(shù)包括Fo、Fv、Fm和Fv/Fm。

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