組織學(xué)的研究方法很多，并隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，又不斷創(chuàng)建新技術(shù)，在應(yīng)用中要 根據(jù)研究的目的和內(nèi)容，選用相應(yīng)的方法才能獲得預(yù)期的效果。 1. 涂片、鋪片、磨片標(biāo)本的制備涂片標(biāo)本的制備; 涂片（smear）法是常用的一種方法，如血液等可直接涂于載玻片上制成涂片標(biāo)本，干燥后進(jìn)行固定、染色及封固。鋪片標(biāo)本的制備;（stretched preparation）法用于疏松結(jié)締組織、神經(jīng)等柔軟組織或腸系膜等薄層組織，可將其鋪于載玻片上，撕開、展平制成鋪片標(biāo)本，待干燥后進(jìn)行固定染色。磨片標(biāo)本的制備;（ground section）法是用于堅(jiān)硬組織的標(biāo)本制作，如骨和牙等堅(jiān)硬組織除用酸（如稀硝酸）脫鈣后再按常規(guī)制成切片標(biāo)本外，也可直接將其磨成薄的磨片標(biāo)本進(jìn)行觀察。切片標(biāo)本的制備觀察機(jī)體各部的微細(xì)結(jié)構(gòu)時(shí)，首先要制成薄片，就是切片法，其中以石蠟切片（Paraffin section）為常見。
其制備程序大致如下： ① 取材與固定： 取材要盡量以人體材料為主，輔以動(dòng)物材料。取得新鮮材料后，切成適當(dāng)?shù)男K1.0立方厘米大小）立即投入固定劑（fixative）中進(jìn)行固定，使組織中蛋白質(zhì)迅速凝固，防止組織自溶或腐敗，以保持生活狀態(tài)下的結(jié)構(gòu)。常用的固定劑有甲醛、酒精、醋酸、苦味酸、餓酸等。 ② 脫水（dehydtation）、透明（clearing）與包埋（embedding）:把固定好的材料用乙醇將組織內(nèi)的水分脫掉，經(jīng)二甲苯透明后，再浸入已融化的石蠟中進(jìn)行浸透、包埋。 ③ 切片（section）與染色（staining）：用切片機(jī)（microtome）切成5～10μm的薄片，貼于載玻片上，脫蠟后進(jìn)行染色，常用的染色法是蘇木精（hematoxylin,haematoxylin)和伊紅（eosin）染色簡(jiǎn)稱HE染色。配制后的蘇木精染波呈堿性，可使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的核糖體等染成藍(lán)紫色，稱嗜堿性（basophilia)；伊紅是酸性染料，可使多數(shù)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)染成粉紅色，稱嗜酸性（acidophilia）；耐堿性和酸性染液親合力都不強(qiáng)的，稱為中性（neutroPhilia）； ④ 封固（mounting）：切片經(jīng)脫水、透明后，于切片上滴加中性樹膠和蓋片進(jìn)行封固后，貼標(biāo)簽備用。除HE染色外，還有多種染色方法。有的能特異性的顯示細(xì)胞內(nèi)某些結(jié)構(gòu)，如使用雷鎖辛品紅（resorcin-fuchsin)染液顯示組織內(nèi)的彈性纖維；有的細(xì)胞經(jīng)重鉻酸鹽處理后，呈棕褐色，稱嗜鉻性（chromaffinity）；有的組織成分經(jīng)硝酸銀處理時(shí)，可使硝酸銀還原，形成銀微粒附著在組織中呈棕黑色，該特性稱為親銀性（argentaffin）；有的組織結(jié)構(gòu)成分，本身不能使硝酸銀還原，需加還原劑方能使硝酸銀還原，形成棕褐色很微粒附著在組織結(jié)構(gòu)上，這種性質(zhì)稱為嗜銀性（argyrophilia）；如肥大細(xì)胞中的顆粒經(jīng)甲苯胺藍(lán)（tofuidine blue）等堿性染料染色后,呈紫紅色，這種現(xiàn)象稱異染性(metachromasia），其原理可能是染料在溶液中以單體存在時(shí)呈藍(lán)色，當(dāng)它與顆粒中具有大量陰離子的多糖成分耦合后，聚合成多聚體而呈紫紅色。除石蠟切片外，在制作較大結(jié)構(gòu)（如眼球、睪丸等）的切片時(shí)，常用火棉膠包埋法；骨和牙等堅(jiān)硬的組織，可用弱酸（稀硝酸）脫鈣后，用石蠟或火棉膠切片（celloidin section）法制成切片標(biāo)本；還有，為了較好地保存細(xì)胞內(nèi)的酶活性或盡快制成切片標(biāo)本的需要，可選用冷凍切片（frozen section），它是將組織先在低溫下快速凍結(jié)，經(jīng)直接切片后進(jìn)行染色，或?qū)⒔M織塊置入液氮（-196℃）內(nèi)快速冷凍，用恒冷箱切片（cryostat section）后進(jìn)行染色
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