將一定量薄層層析硅膠裝人搪瓷盤(pán)置于烘箱中，于105。C活化2H后，取出放置室溫即可裝柱。柱子采用干法填充，填滿(mǎn)整個(gè)柱體，不留死體積，密封后用柱塞式計(jì)量溶劑泵按丙酮一石油醚(5：95)比例泵人溶劑，至溶劑流出止。

上樣

    將冬凌草的乙醇提取物400G用適量丙酮溶解，泵人中壓柱柱頭，然后泵人石油醚1000RID。

洗脫

    以一定比例的石油醚一丙酮為洗脫液，60ML/MIN的流速進(jìn)行梯度洗脫，柱的使用壓力為2～ 3KG/C 。按每份500ML收集，TLC檢識(shí)展開(kāi)劑丙酮一氯仿(2：8)，顯色劑5%香草醛濃硫酸乙醇液至洗脫完全，相同流份合并，回收溶劑。將冬凌草甲素流份合并蒸干。加人適量甲醇熱溶后自然放置，析出結(jié)晶，為冬凌草甲素。

層析柱再生、平衡

    有效成分經(jīng)TLC檢識(shí)全部流出后，用純丙酮5000ML再生，丙酮一石油醚(5：95)平衡后，可再次上樣，反復(fù)使用(使用次數(shù)隨原料不同而異，一般可連續(xù)使用2—6個(gè)月以上)。

重結(jié)晶

    冬凌草甲素結(jié)晶析出完全后，減壓過(guò)濾，然后用少量甲醇洗滌(洗滌液保留，作下次熱溶冬凌草甲素用)。將冬凌草甲素再用適量甲醇熱溶后放置，結(jié)晶再次析出，待結(jié)晶完全后，抽濾，用少量乙醚洗滌，將結(jié)晶室溫下晾干后置真空干燥箱中，35度真空干燥至恒重。密封于瓶中，置干燥器中保存。

薄層層析分析

    取適量冬凌草甲素對(duì)照品及由上述方法得到的冬凌草甲素樣品甲醇溶解后點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿一丙酮(8：2)為展開(kāi)劑進(jìn)行展開(kāi)，5% 香草醛濃硫酸乙醇液顯色，于105。C烘至斑點(diǎn)清晰。表明在該展開(kāi)系統(tǒng)下，冬凌草甲素樣品和對(duì)照品都具有相同的RF值，并呈現(xiàn)出同樣的藍(lán)綠色斑點(diǎn)，在制備的冬凌草甲素樣品中，沒(méi)有雜質(zhì)斑痕。

尊敬的客戶(hù)：

　　您好，我司致力為廣大用戶(hù)提供高品質(zhì)產(chǎn)品、完整的解決方案和上等的技術(shù)服務(wù)。主要產(chǎn)品有恒流泵，核酸蛋白檢測(cè)儀，電泳槽，漩渦混合器，脫色搖床，電泳儀，蠕動(dòng)泵等等。您可以通過(guò)網(wǎng)頁(yè)撥打本公司的服務(wù)專(zhuān)線(xiàn)了解更多產(chǎn)品的詳細(xì)信息，至善至美的服務(wù)是我們永無(wú)止境的追求，歡迎新老客戶(hù)放心選購(gòu)自己心儀產(chǎn)品，我們將竭誠(chéng)為您服務(wù)！