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NTA-辣根過氧化物酶
（NTA-HRP）
產(chǎn)品說明
Ni-NTA HRP 是由Ni-NTA 共價偶聯(lián)HRP 后得到，每個HRP 共價結(jié)合2-3 個Ni-NTA，Ni-
NTA 可以高特異性結(jié)合6xHis 標(biāo)簽。該產(chǎn)品可以廣泛用于ELISA、Western Blotting、**組化
等試驗，用以特異性檢測6xHis 標(biāo)簽。這種產(chǎn)品簡化了檢測6xHis 標(biāo)簽的操作，實現(xiàn)了一步檢
測，特別是在以小鼠為宿主的標(biāo)簽蛋白檢測中，可以避免小鼠抗體引起的交叉反應(yīng)。
產(chǎn)品優(yōu)勢
· 簡化實驗步驟，無需二抗，一步完成
· 節(jié)約了時間，同時免去了多步反應(yīng)所需的優(yōu)化步驟
· 避免小鼠抗體引起的交叉反應(yīng)
產(chǎn)品濃度和儲存
1mg/mL ，含50%甘油（PBS）； -20℃，保存2 年
使用方法
1. ELISA 實驗中，1:1000-10000 稀釋使用；Western Blotting、**組化實驗中，建議
1:100-2000 稀釋使用。
2. 封閉液：封閉液應(yīng)該選用1%BSA/TBST 緩沖液，避免用牛奶；
3. 緩沖液成分：應(yīng)該避免EDTA、咪唑或者其他二價金屬離子；
4. 在 WB 實驗中，如果需要去除膜上的NTA-HRP，只需要把浸入100mM咪唑，震蕩洗滌30 分鐘，然后用緩沖液洗滌即可，非常簡單方便；
注意事項
· 避免和EDTA 等金屬螯合劑共同使用，這類試劑會螯合Ni-NTA 中的鎳離子，影響
NTA 和6xHis 的結(jié)合；
· 咪唑同樣會和鎳離子結(jié)合，緩沖液中含有咪唑會影響NTA 和6xHis 的結(jié)合；
· 信號沒有或者太弱：1）6xHis 沒有充分暴露，WB 可以在轉(zhuǎn)膜后用巰基乙醇和6M 尿
素處理膜，然后在加NTA-HRP，Elisa 可以在包板前，先對蛋白加入巰基乙醇后加熱
處理；2）目標(biāo)蛋白或者NTA-HRP 量太少，應(yīng)增加用量，延長反應(yīng)和曝光時間；
· 背景太高：1）封閉不徹底；2）目標(biāo)蛋白或者NTA-HRP 量太多；
· 雜帶：1）WB 高分子量雜帶，處理樣品不徹底，應(yīng)該加入DTT 并煮沸處理；2）目標(biāo)
降解產(chǎn)生低分子量雜帶；
相關(guān)產(chǎn)品
各種標(biāo)簽抗體（HA、GFP）、超靈敏ECL 顯色液、NTA-Ni resin、GST-resin…..
NTA-辣根過氧化物酶（NTA-HRP），說明書，大量現(xiàn)貨