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transwell細胞培養(yǎng)的原理及應用
transwell細胞培養(yǎng)
是一種侵襲實驗技術,其實原理簡單地說就是用一層膜將高營養(yǎng)的培養(yǎng)液和低營養(yǎng)的培養(yǎng)液隔開,細胞放在低營養(yǎng)的培養(yǎng)液里,為了找吃的,細胞會往高營養(yǎng)的培養(yǎng)液里面跑,但是有膜擋著,所以要穿過膜才行。我們在膜上涂上一層基質膠,模仿細胞外基質,于是細胞要把基質消化了才可以從低營養(yǎng)的培養(yǎng)液跑到高營養(yǎng)的培養(yǎng)液里面,*后我們檢測高營養(yǎng)的培養(yǎng)液里細胞量就可以知道細胞的侵襲能力了。
主要應用有:
?。?)共培養(yǎng)體系:小于3.0um孔徑條件下,細胞不會遷徙通過,因此,若研究不涉及細胞運動能力,不需要細胞穿過聚碳酸酯膜,則應選擇3.0µm以下孔徑。常用0.4、3.0µm。常用的是0.4µm。將細胞A種于上室,細胞B種于下室,可以研究細胞B分泌或代謝產生的物質對細胞A的影響。
?。?)趨化性實驗:可用5.0、8.0、12.0µm膜,上室細胞可穿過聚碳酸酯膜進入下室,計數(shù)進入下室的細胞量可反映下室成分對上室細胞的趨化能力。①細胞B對細胞A的趨化作用:將細胞A種于上室,細胞B種于下室,可以研究細胞B分泌或代謝產生的物質對細胞A的趨化作用。②趨化因子對細胞的趨化作用:將細胞種于上室,下室加入某種趨化因子,可研究該趨化因子對細胞的趨化作用。
?。?)腫瘤細胞遷移實驗:常用8.0、12.0µm膜,上室種腫瘤細胞,下室加入FBS或某些特定的趨化因子,腫瘤細胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑,計數(shù)進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的遷移能力。
(4)腫瘤細胞侵襲實驗常用8.0、12.0µm膜,原理與腫瘤細胞遷移實驗類似。
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