国产精品久久久久久亚洲,国产成人无码午夜视频在线观看 ,国产福利一区二区三区在线观看,国产av第一次处破,厨房玩弄丝袜人妻系列国产电影

首頁(yè) >>> 技術(shù)文章 >

技術(shù)文章

凍豬胃中鼠傷寒沙門氏菌的分離與鑒定-ATP熒光檢測(cè)儀技術(shù)文章
凍豬胃中鼠傷寒沙門氏菌的分離與鑒定-ATP熒光檢測(cè)儀技術(shù)文章

沙門氏菌是重要的人畜共患病病原,引起人和動(dòng)物傷寒、副傷寒和食物中毒,臨床表現(xiàn)為
急性胃腸炎癥,有突發(fā)性劇烈**、腹瀉、嘔吐、感覺(jué)不適和體溫升高等。我們對(duì)送檢的冷凍豬
副產(chǎn)品(豬胃) 進(jìn)行致病菌檢驗(yàn),結(jié)果分離出一株鼠傷寒沙門氏菌,抗原式為4 ,5 :i :1 ,2 。現(xiàn)將
**的分離、鑒定、試驗(yàn)動(dòng)物致病性試驗(yàn)以及藥敏試驗(yàn)情況報(bào)告如下。
1 　試驗(yàn)材料
1. 1 　被檢材料　客戶送檢的凍豬胃,于- 30 ℃冰箱保存。
1. 2 　培養(yǎng)基　營(yíng)養(yǎng)肉湯、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC) 、DHL 瓊脂、三糖鐵瓊脂( TSI) 、均購(gòu)自北京陸橋微生物制劑有限公司。氯化三苯四氮唑動(dòng)力鑒別培養(yǎng)基( TTC) 和綿羊鮮血瓊脂平板自備。
1. 3 　**微量鑒定管(批號(hào)為20011012) 和藥敏試紙(批號(hào)為20011120) 　購(gòu)自杭州天和微生物試劑有限公司。
1. 4 　沙門氏菌診斷血清　購(gòu)自蘭州生物制品研究所,批號(hào)為20011004 。
1. 5 　試驗(yàn)動(dòng)物　15 克左右的小白鼠,購(gòu)自廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)車間。
2 　實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)
2. 1 　**增菌培養(yǎng)　待檢凍豬胃,于37 ℃待其解凍后,按隨機(jī)取樣的方法,無(wú)菌剪取豬胃25 克,加在裝有225ml 營(yíng)養(yǎng)肉湯的均質(zhì)器內(nèi),以8000r/ min 打碎1min , 轉(zhuǎn)至500ml 廣口瓶?jī)?nèi),于3615 ℃培養(yǎng)4h ,移取10ml 轉(zhuǎn)種于100mlSC 增菌液內(nèi),于3615 ℃培養(yǎng)24h 。
2. 2 　**的分離培養(yǎng)　取SC 增菌液一環(huán),接種于二個(gè)DHL 平板,3615 ℃培養(yǎng)24h 觀察結(jié)果。結(jié)果在DHL 瓊脂平板上分離出邊緣透明、中心呈黑色的單個(gè)菌落,成片生長(zhǎng)的菌落幾乎全呈黑色。挑取單個(gè)菌落接種普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂和血瓊脂平板,進(jìn)一步分離純化后接種營(yíng)養(yǎng)肉湯;接種TSI 瓊脂斜面,轉(zhuǎn)種時(shí)先穿刺底層再涂布斜面;穿刺接種TTC 鑒別培養(yǎng)基,于3615 ℃培養(yǎng)24h 。結(jié)果分離出一株**,該菌株在肉湯表面形成菌膜,肉湯均勻混濁,管底有灰白色沉淀物;普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂上的菌落,無(wú)色透明,表面光滑,圓形較為扁平、粘稠;在血瓊脂上的菌落,無(wú)色透明,表面光滑,菌落比普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂上的大2～3 倍,并形成溶血環(huán); TSI 瓊脂斜面變紅,底層產(chǎn)酸產(chǎn)氣,H2S 陽(yáng)性;分離菌在TTC 上有運(yùn)動(dòng)性,并形成粉紅色菌膜。
3 　**的鑒定
3. 1 　**形態(tài)特征觀察　將24h 血瓊脂斜面培養(yǎng)的純菌落,加生理鹽水均勻涂片,火焰固定,革蘭氏染色后觀察。結(jié)果為革蘭氏陰性無(wú)芽孢短桿菌,大小均勻,單在、兩端鈍圓。
3. 2 　生化試驗(yàn)　按中國(guó)食品沙門氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)( GB4789. 4 - 1994) 的方法進(jìn)行生化試驗(yàn),分離菌株的生化反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果為:H2S( + ) 、靛基質(zhì)( - ) 、尿素( - ) 、KCN 生長(zhǎng)管( - ) 、KCN 對(duì)照管( + ) 、賴氨酸脫羧酶( + ) ,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)中腸桿菌科各屬生化反應(yīng)初步鑒別表初步鑒定為沙門氏屬**。
3. 3 　梅里奧微生物自動(dòng)分析儀鑒定**　取鮮血平板上培養(yǎng)18h 的純菌落,按自動(dòng)分析儀操作要求對(duì)分離菌作沙門氏菌證實(shí)試驗(yàn)。鑒定卡的30 項(xiàng)生化指標(biāo)試驗(yàn)結(jié)果如下: 三氯新( - ) 、尿素( - ) 、麥芽糖( + ) 、肌醇( - ) 、阿拉伯
糖( + ) 、葡萄糖氧化( + ) 、枸椽酸鹽( + ) 、甘露醇( + ) 、側(cè)金盞花醇( - ) 、葡萄糖發(fā)酵( + ) 、陽(yáng)性生長(zhǎng)抑制( + ) 、丙二酸鹽( - ) 、木糖( + ) 、香豆酸( - ) 、精氨酸( - ) 、乙酰氨( - ) 、苯丙氨酸( - ) 、H2S( + ) 、棉子糖( - ) 、賴氨酸( + ) 、七葉樹(shù)苷( - ) 、多粘菌素B ( - ) 、山梨醇( + ) 、β- 半乳糖苷酶( - ) 、鳥(niǎo)氨酸( + ) 、植物尿藍(lán)母( - ) 、乳糖( - ) 、蔗糖( - ) 、鼠李糖( + ) 、氧化酶( - ) 。培養(yǎng)8h ,自動(dòng)分析儀報(bào)告*終鑒定結(jié)果,100 %為沙門氏菌。
3. 4 　血清學(xué)分型試驗(yàn)　采用玻片凝集法,在潔凈玻片上滴加一滴A - F 多價(jià)O 血清,用接種針挑取鮮血平板上純化的菌落,與血清混合均勻,結(jié)果在30 秒鐘內(nèi)出現(xiàn)凝集反應(yīng),而生理鹽水對(duì)照為陰性;接著用各群O 抗原因子血清,
即O1 、O2 、O4 、O5 、O7 、O8 、O9 、O10 、O11 對(duì)被檢菌逐一進(jìn)行凝集試驗(yàn)檢查,再用陽(yáng)性反應(yīng)群
所包含的各個(gè)O 因子血清確定其O 抗原組成,然后再用該菌所屬群的H 因子血清檢查第1相和第2 相的H 抗原。結(jié)果被檢菌株的抗原式為:4 ,5 :i :1 ,2 。經(jīng)血清型鑒定,該菌株為鼠傷寒沙門氏菌。
4 　致病性試驗(yàn)
取15 克左右健康小白鼠8 只,分成兩組,**組5 只,每只腹腔接種含1. 3 億分離菌的肉湯培養(yǎng)物稀釋液011ml ,**組3 只,每只注射生理鹽水011ml 作為對(duì)照。結(jié)果接種后24h ,注射被檢菌的小白鼠活動(dòng)減少,被毛松散,毛色失去光澤,蹲伏在飼養(yǎng)籠的角落處,在35- 40h 之間5 只小白鼠全部死亡,尸檢見(jiàn)腸粘膜充血,肝充血腫大,用接種環(huán)取肝組織劃線接種DHL 瓊脂平板,結(jié)果重新分離出被檢菌。對(duì)照組小白鼠正常。
5 　藥敏試驗(yàn)
按常規(guī)紙片法進(jìn)行試驗(yàn),分離菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果為:丁胺卡那18 毫米、復(fù)方新諾明0 毫米、先鋒V 26 毫米、青霉素0 毫米、氨芐青霉素15 毫米、紅霉素0 毫米、氯霉素25 毫米、氟哌酸30 毫米、環(huán)丙沙星25 毫米、慶大霉素20 毫
米。
6 　小結(jié)與討論
6. 1 　經(jīng)病原的分離培養(yǎng)以及**鑒定,證實(shí)從凍豬胃分離到的**為鼠傷寒沙門氏菌,抗原模式為:4 ,5 :i :1 ,2 。該型**具有廣泛的致病力,可致人類的食物中毒,能引起各種禽畜以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)病。病原隨污染的食物、飼料和水源等經(jīng)口途徑感染進(jìn)入小腸,大量繁殖,產(chǎn)生腸**,引起腹瀉、嘔吐;**侵入腸下部的集合**結(jié)以及孤立**濾泡,經(jīng)**管到達(dá)腸系膜**結(jié)并大量增殖,當(dāng)**溶解后釋放出內(nèi)**,**進(jìn)入血液時(shí)出現(xiàn)發(fā)熱、全身不適等癥狀。從送檢的冰凍豬胃中檢出鼠傷寒沙門氏菌,該批食品巳不符合食品衛(wèi)生檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn),對(duì)人體健康潛在嚴(yán)重的威脅,因此,要求客戶對(duì)同批全部?jī)鲐i胃作無(wú)害化處理。
6. 2 　沙門氏菌不同血清型對(duì)不同種類動(dòng)物的致病性不完全相同,少數(shù)血清型具有高度的選擇性,如傷寒和副傷寒沙門氏菌僅對(duì)人有致病性;同一菌型對(duì)不同種動(dòng)物感染致病的劑量以及感染途徑和動(dòng)物的狀態(tài)有關(guān),文獻(xiàn)報(bào)道,鼠傷
寒沙門氏菌靜脈注射小白鼠,可自腸道排出**,具有高度傳染性,而自小白鼠腹腔途徑接種小白鼠,病原菌不經(jīng)腸道排出。我們選擇小白鼠腹腔注射113 億分離菌,接種的5 只小白鼠在40h 內(nèi)全部死亡,說(shuō)明分離出的**具有強(qiáng)
致病力;選擇腹腔接種,減少了病原菌污染試驗(yàn)場(chǎng)地和向周圍環(huán)境擴(kuò)散的危險(xiǎn)性。
6. 3 　分離的鼠傷寒沙門氏菌,對(duì)先鋒ⅴ、氯霉素、氟哌酸、環(huán)丙沙星高敏,對(duì)丁胺卡那、氨芐青霉素、慶大霉素中敏,而對(duì)復(fù)方新諾明、青霉素和紅霉素耐藥。根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果,如果感染鼠傷寒沙門氏菌引起人的食物中毒以及動(dòng)物發(fā)病,可作為用藥參考。

ATP熒光檢測(cè)儀技術(shù)文章