microRNA芯片:
RNA干擾(RNA Interference, RNAi)現(xiàn)象是一種進(jìn)化上保守的抵御轉(zhuǎn)基因或外來(lái)病毒侵犯的防御機(jī)制。將含有靶基因mRNA同源互補(bǔ)序列的RNA(Double strand RNA, dsRNA)導(dǎo)入細(xì)胞后,能夠特異地識(shí)別該mRNA,引起mRNA的降解,從而導(dǎo)致相應(yīng)的功能缺失。RNAi提供了一種經(jīng)濟(jì)、快捷、高效的抑制特異基因表達(dá)的技術(shù)手段,該技術(shù)已被廣泛用于研究基因功能和傳染性**及惡性腫瘤基因**領(lǐng)域。目前常用的RNA干擾手段為miRNA、 shRNA 和siRNA等。
MiRNA是一類可以通過RNAi機(jī)制調(diào)節(jié)基因表達(dá)的內(nèi)源性小RNA,人工miRNA與shRNA的設(shè)計(jì)原理基本相同,由于miRNA具有內(nèi)源性,因此其更易產(chǎn)生有效的基因沉默。
技術(shù)流程:
dsRNA或pre-miRNA被導(dǎo)入細(xì)胞后,能夠被一種特異的核酸內(nèi)切酶(Dicer)識(shí)別并切割成為小片段,這些片段在RNA解旋酶的作用下解鏈。繼之反義鏈在與體內(nèi)一些酶(包括內(nèi)切酶、外切酶、解旋酶等)結(jié)合形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物(RNA-Induced Silencing Complex,RISC),RISC與mRNA同源區(qū)進(jìn)行特異性結(jié)合,若miRNA與mRNA的結(jié)合位點(diǎn)配對(duì),則切割mRNA;若miRNA與mRNA的結(jié)合位點(diǎn)不配對(duì),則抑制mRNA的**。
服務(wù)內(nèi)容:RNA抽提,QC,RNA標(biāo)記,芯片雜交,數(shù)據(jù)分析,實(shí)驗(yàn)完整報(bào)告。