一、服務介紹
穩(wěn)定細胞系是指將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上，載體被轉染到宿主細胞并整合到染色體中，用載體中所含的抗性標志進行篩選，篩選得到可穩(wěn)定表達目的蛋白，或者穩(wěn)定表達沉默特定基因的細胞株。常用物理方法（電轉）、化學方法（脂質體等）、生物方法（病毒）。
二、實驗原理
外源基因在細胞中的表達可分為兩大類，一類是瞬時表達，一類是穩(wěn)定表達（又叫長久表達）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，雖然可以達到高水平的表達，但通常只持續(xù)幾天。后者外源DNA整合到宿主細胞染色體上，使宿主細胞可長期表達目的基因。建立穩(wěn)定細胞株，一般是根據不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應的**對靶細胞進行篩選。常用的抗性標記基因有潮霉素（hygromycin）、新霉素（neomycin）和嘌呤霉素（puromycin）。
三、實驗流程
1、載體構建（表達質粒載體、病毒載體）；
2、轉染/感染；
3、目的蛋白初步檢測；
4、***篩選；
5、目的蛋白再次檢測（定性/半定量）；
6、單克隆細胞株穩(wěn)定性檢測。
四、 客戶提供
培養(yǎng)好的細胞
五、 公司提供：
基本實驗步驟、圖片、數據分析結果和穩(wěn)定表達細胞株
實驗周期：大約3-4月左右，具體需要根據細胞實驗內容而定。
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