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細胞系或細胞株的建立
1、細胞系(Cell Line):原代培養(yǎng)經(jīng)次傳代成功即成細胞系,由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系(Lineage of Cells)所組成。
2、細胞株(Cell Strain):通過選擇法或 克隆 形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物稱為細胞株。細胞株的特殊性質(zhì)或標志在整個培養(yǎng)期間始終存在。如果不能繼續(xù)傳代或傳代數(shù)有限,稱為有限細胞株(finitecell strain);如果可以持續(xù)傳代,稱為持續(xù)細胞株(continuous cell strain)。對于人類腫瘤細胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并持續(xù)傳代的即可稱為持續(xù)性株或系。
建立細胞系(或株)的要求:
什么樣的體外培養(yǎng)群可被認可為己鑒定的細胞,視具體情況而定,無統(tǒng)一規(guī)定。對于用作原代培養(yǎng)的細胞只要供體均一,取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可,如用做長期培養(yǎng),特別是反復(fù)傳代的細胞,常需做如下說明:
1、組織來源:細胞供體所屬物種,來自人體或者動物;
個體性別、年齡;取材的器官或組織。
如系腫瘤組織,應(yīng)說明臨床和病理診斷,以及病歷號等。
2、細胞生物學檢測:
了解細胞一般和特殊的生物學性狀,如細胞一般形態(tài),特異結(jié)構(gòu),細胞生長曲線和分裂指數(shù),倍增時間,接種率等。
如為腫瘤細胞,為說明來源于原腫瘤組織并保持惡性,須做軟瓊脂培養(yǎng),異體接種致瘤和對正常組織侵潤力等實驗。
3、培養(yǎng)條件和方法;應(yīng)說明細胞系(或株)適應(yīng)的生存環(huán)境,即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類、用量以及適宜PH值。
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