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**共沉淀CO-IP
**共沉淀CO-IP
(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。
**共沉淀CO-IP
(Co- Immunoprecipitation, Co-IP)是利用抗原和抗體的特異性結合以及**的Protein A或G特異性地結合到**球蛋白的Fc片段的現(xiàn)象開發(fā)出來的方法。其基本原理是,在細胞裂解液中加入抗興趣蛋白的抗體,孵育后再加入與抗體特異結合的結合于Agarose珠上的Protein A或G,若細胞中有與興趣蛋白結合的目的蛋白,就可以形成這樣一種復合物:“目的蛋白—興趣蛋白—抗興趣蛋白抗體—Protein A或G”,經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳,復合物又被分開。然后經(jīng)**印跡或質譜檢測目的蛋白。這種方法得到的目的蛋白是在細胞內與興趣蛋白天然結合的,符合體內實際情況,得到的結果可信度高。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合;也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。
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