概述：

克隆構(gòu)建是分子生物學(xué)研究中常用到的手段之一。但由于影響因素較多，對(duì)研究者經(jīng)驗(yàn)要求較高，因而往往費(fèi)時(shí)費(fèi)力。我公司憑借長期分子生物學(xué)工作的豐富經(jīng)驗(yàn)，集中人力，為您提供更高效、更快捷的服務(wù)，包括克隆構(gòu)建及其上下游相關(guān)服務(wù)的完整解決方案，并將依據(jù)目的基因的來源，靈活選擇不同的克隆方法，包括從基因組中分離目的基因，由特定mRNA逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA后再進(jìn)行克隆和PCR體外擴(kuò)增目的片段進(jìn)行克隆等。

1、載體構(gòu)建

可根據(jù)已有載體進(jìn)行改造方案的設(shè)計(jì)，完成現(xiàn)有載體不同功能元件的改造；可應(yīng)客戶要求將指定片段亞克隆至各載體。

（1）您需要提供

載體改造的具體要求、預(yù)進(jìn)行改造的質(zhì)粒（序列經(jīng)測序驗(yàn)證正確）及其圖譜和序列、能夠獲得所需元件或基因的模板（質(zhì)?；蚱渌┘捌湎嚓P(guān)圖譜和序列。

（2）我們提供

構(gòu)建好的質(zhì)粒、菌種，測序驗(yàn)證報(bào)告。

2、ORF克隆

從動(dòng)物組織或細(xì)胞中提取mRNA，通過RT-PCR擴(kuò)增獲得所需目的基因，并克隆到T載體或由客戶指定的載體當(dāng)中。

（1） 您需要提供

目的基因序列，能夠獲得目的基因序列的材料或上述材料的總RNA：1) 實(shí)驗(yàn)材料新鮮，請(qǐng)您采樣后立即放入液氮中速凍或加入樣品穩(wěn)定劑；2)總RNA無明顯降解，總量大于5 mg。如果基因豐度較低或調(diào)取的基因較長，請(qǐng)您提供盡量多的材料。

（2） 我們提供

含有目的基因的質(zhì)粒及菌種。由于材料的個(gè)體差異等原因，我們不獲取的基因與參考序列的堿基一致。

3、PCR產(chǎn)物克隆

直接將客戶提供的PCR產(chǎn)物（3’端加A）克隆至T載體中。

（1） 您需要提供

體積大于40ul，總量不少于1ug的PCR產(chǎn)物及克隆片段大小。

（2） 我們提供

含有目的片段的質(zhì)粒和菌種及測序驗(yàn)證報(bào)告。

4、定點(diǎn)突變

體外定點(diǎn)突變技術(shù)是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能之間的復(fù)雜關(guān)系的有力工具，也是我們?cè)趯?shí)驗(yàn)室中改造、優(yōu)化基因的常用的手段。我公司依靠豐富的分子生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，可幫您完成不同載體不同難度的定點(diǎn)突變，根據(jù)突變需要，向目的基因片段中引入可能的DNA變異，包括一段堿基的添加、刪除、替換等。使您能夠順利完成下一步的試驗(yàn)計(jì)劃，并節(jié)省您寶貴的時(shí)間。

（1） 您需要提供

原始質(zhì)粒、質(zhì)粒圖譜（包括大小信息）和序列、突變位點(diǎn)要求。

（2）我們提供

突變成功的質(zhì)粒和菌株及測序報(bào)告。

5、基因合成

人工合成寡核甘酸片段，通過PCR拼接的方法，獲得所需要的基因片段或者啟動(dòng)子等功能元件片段。盡管獲得特定基因的方法在目前已有很多，但人工合成的方法有其很多無可比擬的優(yōu)點(diǎn)，可以的調(diào)整基因中的密碼子以適應(yīng)不同的表達(dá)體系中的需要，可獲得難以從自然界中釣取的基因。同時(shí)，對(duì)于復(fù)雜的片段，我們將采用靈活的針對(duì)性策略為您合成。

（1）您需要提供

所要合成的基因序列；如果您需要克隆于特定載體中，請(qǐng)?zhí)峁┰撎囟ㄝd體（客戶所提供的載體經(jīng)過明確地測序驗(yàn)證）。

（2）我們提供

克隆有全長基因的質(zhì)粒、菌種和測序結(jié)果。

溫馨提示：基爾頓生物科技（上海）有限公司，主營：實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)，核酸化系列試劑盒，細(xì)胞株等，如您想了解我們其他產(chǎn)品，您可以通過網(wǎng)頁撥打我們的服務(wù)電話了解更多產(chǎn)品的詳細(xì)信息，至善至美的服務(wù)，是我們永無止境的追求！