轉(zhuǎn)錄組測序和表達譜測序的區(qū)別
1. 英文名稱:RNA-seq(Transcriptome)
2. 產(chǎn)品的定義:
通過RNA測序,既想得到樣本中序列的信息,又需要對序列的表達進行定量和分析。
那么,對于沒有參考基因組的物種,RNA-seq(Transcriptome) 當(dāng)然就是需要:
a.進行de novo拼接,對拼接得到的Unigene進行注釋;
b.然后計算de novo得到的Unigene的表達量。所以,這個分析就包含了核酸序列分析和核酸表達定量分析。
對于已有參考基因組的物種,RNA-seq(Transcriptome) :
a.會對測序結(jié)果進行基于參考基因組的比對和拼接,從而分析樣本中轉(zhuǎn)錄本的可變剪切、基因融合、SNP變異等此類針對轉(zhuǎn)錄本序列的分析;
b.在序列分析的基礎(chǔ)上,在分析轉(zhuǎn)錄本的表達量。所以,這個分析也包含了核酸序列的分析和核酸表達量的分析。
3. 對測序的要求:因為涉及到序列的拼接和組裝,所以轉(zhuǎn)錄組測序?qū)?shù)據(jù)量的要求較高(一般單個樣本的測序量> 4G),同時一般要求使用雙末端測序(Paired end)的數(shù)據(jù)。
表達譜測序
1. 英文名稱:RNA-seq(qualification)
2. 產(chǎn)品的定義:
Qualification,顧名思義,這個產(chǎn)品的定義就是只對樣本中mRNA進行定量分析,而不需要分析mRNA序列的變化。通常此類分析,需要參考序列。參考序列可以是:基因組序列(有參考基因組的物種)或轉(zhuǎn)錄組序列(無參考基因組物種,轉(zhuǎn)錄組de novo拼接的結(jié)果)。
對此類產(chǎn)品的分析要求僅僅是:將測序得到的數(shù)據(jù)比對到參考序列上,然后計算參考序列的在樣本中的對應(yīng)表達,而不需要去分析參考序列在樣本中是否發(fā)生了序列變化(可變剪切、基因融合、SNP等)。
3. 對測序的要求:
因為僅僅是定量分析,所以表達譜對測序的要求較低。一般單個樣本的測序量2~3G足夠,同時單末端測序(single End)和雙末端測序(paired End)的數(shù)據(jù)均可以分析。
新時期的變化
由于測序技術(shù)不斷發(fā)展,測序成本不斷下降。目前,當(dāng)個樣本的測序量一般都已經(jīng)超過4G,而且大部分項目都使用雙末端測序的策略。所以,這些數(shù)據(jù)都已經(jīng)足夠支持進行轉(zhuǎn)錄組分析的要求。所以,現(xiàn)在沒有必要進行轉(zhuǎn)錄組和表達譜的區(qū)分,可以統(tǒng)稱為RNA-seq。對用戶來說,所需要關(guān)心的是:公司的RNA-seq分析可以提供哪些后續(xù)的分析?是否可以滿足你的科研的需求。
so,能夠真正解決測序后的數(shù)據(jù)后續(xù)分析問題才是王道。不巧,基爾頓生物科技(上海)有限公司正是如此。