**共深沉（Co-IP）哪家好？

一、原理：

**共沉淀（Co-IP）技術(shù)是檢測蛋白質(zhì)間相互作用的常用方法,基本原理是用細胞內(nèi)源性靶蛋白為誘餌，將靶蛋白抗體與細胞總蛋白進行共孵育，促進**復(fù)合物的合成；隨后加入能夠與抗體Fc段結(jié)合的proreinA/G（提前結(jié)合固化在瓊脂糖小珠上），形成“結(jié)合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗體-proteinA/G小珠”復(fù)合物，純化該復(fù)合物后凝膠電泳分離蛋白，應(yīng)用Westernblot或者質(zhì)譜技術(shù)鑒定靶蛋白的結(jié)合蛋白。

和另外研究方法相比，**共沉淀大的優(yōu)勢在于該體系是在生理條件下檢測蛋白質(zhì)之間的相互作用，因此，不僅可以檢測到體內(nèi)形成的天然復(fù)合體，而且可排除過表達靶蛋白所帶來的假陽性。其次內(nèi)源性的靶蛋白質(zhì)是加工、修飾和成熟的蛋白質(zhì)，因此，依賴于修飾的蛋白質(zhì)相互作用也能被檢測到。

二、**共沉淀（Co-IP）實驗步驟：

1.  構(gòu)建表達質(zhì)粒

2.  共轉(zhuǎn)細胞

3.  收集并裂解細胞

4.  加入蛋白A/G和抗體共同孵育

5.  Westernblot檢測