組織切片技術(shù)哪家靠譜一點(diǎn)？上?；鶢栴D告訴你

一、概述

組織學(xué)技術(shù)包括：組織學(xué)制片技術(shù) 組織化學(xué)技術(shù) 熒光組化和**組化技術(shù) 其他各種特殊顯微技術(shù) 電鏡組織學(xué)技術(shù) 組織培養(yǎng)技術(shù)等。

二、組織學(xué)制片技術(shù)的分類

組織學(xué)制片技術(shù)有很多不同的制片方法，一般可分為切 片法與非切片法兩大類：切片法：石蠟切片、火棉膠切片、冰凍切片等。非切片法：鋪片、涂片、壓片、磨片、整裝片等。

1、非切片法

就是不用切片機(jī)，不經(jīng)過切片手續(xù)然后制成切片的方法 ，根據(jù)材料性質(zhì)的不同，有不同的處理方法，該類方法操作簡(jiǎn)單快捷，其中鋪片法，封藏法可使原有組織結(jié)構(gòu)不被破壞，涂片法，壓片法彌補(bǔ)了用包埋，切片 法所不可能觀察清楚的不足，因此是組織標(biāo)本制備中常用的手段。

1.1 涂片法

主要用于血液、精液、尿液、痰液、微生物等不能切片的液態(tài)顆粒性材料，可在載玻片上涂成單層細(xì)胞，再經(jīng)固定，脫水，染色等手段制成標(biāo)本。

1.2 鋪片法

主要用于動(dòng)、植物組織的表皮層觀察，可活體取待 觀察組織，用尖鑷子迅速將組織平鋪在載玻片上。如: 疏松結(jié)締組織鋪片標(biāo)本的制備。

1.3 壓片法

一些較幼嫩，柔軟的材料可將其臵載玻片上，用小解剖刀將其分散，加染料一滴，再蓋上蓋玻片，用 拇指垂直用力擠壓，使組織散成一薄片，再進(jìn)行觀察 ，如骨骼肌運(yùn)動(dòng)終版的制備。

1.4 磨片(Ground section)

用于很堅(jiān)硬的組織，如骨和牙。血涂片、骨磨片、疏松結(jié)締組織鋪片、上皮組織鋪片 鋪片

2、切片法

切片法是依靠切片機(jī)將組織切成薄片來進(jìn)行觀察的方法。為了能清晰地觀察到組織結(jié)構(gòu)及細(xì)胞形態(tài)，先經(jīng)過一系列步驟將組織內(nèi)滲入某些支持物 質(zhì)，使組織變硬以利于切成薄片，根據(jù)所用支持劑的 種類不同，主要分為石蠟切片法，火棉膠切法，冰凍 切片法等類型，切成薄片后還需要脫蠟，染色，脫水，透明等步驟，將其制成標(biāo)本。石蠟切片是基本的切片技術(shù)，冰凍切片和超薄切片等都是在石蠟切片基礎(chǔ)上發(fā)展起來的。現(xiàn)以石蠟切片為例，介紹切片標(biāo)本的制備方法。組織學(xué)制片步驟： 取材 固定 沖洗 脫水 透明、浸蠟 、包埋、 修塊、切片、貼片、烤片、染色、封片

觀察結(jié)果

2.1 取材

根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，選擇相應(yīng)的材料，材料要求 新鮮、準(zhǔn)確、完整，材料要避免擠壓、挫傷、干枯。 所采集材料應(yīng)立即放入固定劑，并編號(hào)，注明采集 時(shí)間、地點(diǎn)、名稱、組織部位，所取組織塊要大小適當(dāng)， 即要能說明問題，又要考慮固定劑的穿透能力。一般組織學(xué)取材稍大，細(xì)胞學(xué)取材稍小，動(dòng)物組織，取材要稍大，植物組織取材稍小。

2.1.1 人體組織標(biāo)本的取材

手術(shù)切除標(biāo)本，各種活檢穿刺標(biāo)本和尸體解剖標(biāo)本。手術(shù)切除標(biāo)本的取材：病灶在組織中的分布常存在不均一性，取材要有代表性，取材部位 要兼顧：主要病灶，病灶與正常組織交界處，遠(yuǎn)離病灶的正常組織。 組織大?。洪L(zhǎng)1cm×寬1cm×厚0.2～0.3cm。各種組織的活檢取材：活檢取材體積小，取材困難，不易取到主要病灶，因此對(duì)標(biāo)本的處 理應(yīng)特別慎重，及時(shí)固定，包埋時(shí)要平整。

2.1.2 動(dòng)物組織標(biāo)本的取材

動(dòng)物的處死方式一般為活殺，組織標(biāo)本來源較新鮮，10min內(nèi)即可完成固定和冷凍保存，腦組織和神經(jīng)組織應(yīng)采用灌注固定后，再進(jìn)行后固定。 制片所需的材料要求越新鮮越好，尤其是細(xì)胞學(xué)方面 的研究對(duì)材料的新鮮程度要求更嚴(yán)。因此，要從活的動(dòng)物 體上采取材料，在一般情況下，要對(duì)動(dòng)物施行麻醉，然后 再割取材料加以固定。所用的***品，以不影響細(xì)胞結(jié)構(gòu)為原則。

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