首先siRNA由于只有二十幾個堿基對,相比DNA幾千上萬對堿基,小了許多。目前大多數(shù)轉(zhuǎn)染試劑都針對比較大的質(zhì)粒DNA,而非小的RNA分子。用于轉(zhuǎn)染DNA的轉(zhuǎn)染試劑和方法并不完全適用于轉(zhuǎn)染siRNA。
其次,siRNA轉(zhuǎn)染比DNA轉(zhuǎn)染對轉(zhuǎn)染試劑細(xì)胞毒性的要求嚴(yán)格。由于轉(zhuǎn)染試劑對細(xì)胞的毒性往往是對眾多基因直接地或間接地上調(diào)或下調(diào)的結(jié)果,這對于過量表達(dá)的DNA轉(zhuǎn)染來說,一些實驗的影響不大,但對于以研究基因干擾為主要目的的RNAi實驗來說,就是致命的,因為細(xì)胞死亡和RNAi實驗造成的結(jié)果在現(xiàn)象上是一致的,輕則影響實驗數(shù)據(jù),重則改變實驗結(jié)果。siRNA實驗首先要求選擇適合轉(zhuǎn)染小的RNA的高效轉(zhuǎn)染試劑,其次要求轉(zhuǎn)染試劑本身的細(xì)胞毒性很小。建議選擇專門針對siRNA的高效、低毒轉(zhuǎn)染試劑。
EntransterTM-R siRNA專用轉(zhuǎn)染試劑,采用先進(jìn)的納米聚合物成分,細(xì)胞毒性非常低,轉(zhuǎn)染時細(xì)胞密度可以低至20%,同時可以有血清有***轉(zhuǎn)染,轉(zhuǎn)染后無需換液,轉(zhuǎn)染效率高,細(xì)胞毒性小,節(jié)約時間、精力和試劑,目前被許多實驗室選用,是一款好的siRNA轉(zhuǎn)染試劑。
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