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ChromaFlash? 一步法磁性 ChIP 試劑盒是一整套優(yōu)化的緩沖液和試劑,使用基于磁珠的方法,用于成功進(jìn)行染色質(zhì)免疫沉淀,以選擇性富集包含來(lái)自分離染色質(zhì)的特定 DNA 序列的染色質(zhì)組分,以研究細(xì)胞中蛋白質(zhì)和 DNA 之間的相互作用。
該試劑盒可與 EpiSonic 2000 *聲處理系統(tǒng)的監(jiān)測(cè)裝置配合使用,或作為獨(dú)立試劑盒*使用。 使用 EpiSonic,染色質(zhì)剪切和免疫沉淀步驟可以同時(shí)進(jìn)行*佳處理,將整個(gè)過(guò)程(從完整染色質(zhì)樣品到即用型 DNA)縮短到 70 分鐘以內(nèi)。
* 沒(méi)有 EpiSonic 2000 的獨(dú)立方案是一個(gè) 4 小時(shí)的程序。
產(chǎn)品特點(diǎn)
下一代測(cè)序和微陣列正在成為大規(guī)模蛋白質(zhì)-DNA 分析的主要技術(shù)。這些技術(shù)的主要特點(diǎn)是其快速和高通量能力。為了與這些新技術(shù)兼容,迫切需要快速、大量生成靶蛋白結(jié)合的 DNA。為了滿足這一要求,Epigentek 開發(fā)了 ChromaFlash?,這是一種新的 ChIP 技術(shù),并將其整合到 ChromaFlash? 磁性一步法 ChIP 試劑盒中。通過(guò)使用該試劑盒和強(qiáng)大的 EpiSonic? 2000 *聲處理系統(tǒng),可以同時(shí)處理染色質(zhì)剪切和免疫沉淀,這極大地推動(dòng)了 ChIP 以高通量形式以*快的速度運(yùn)行,效率更高。該套件具有以下優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn):
- *快速、*方便的 ChIP 方法。整個(gè)過(guò)程(從完整染色質(zhì)樣品到即用型 DNA)不到 70 分鐘,由于同時(shí)處理染色質(zhì)剪切和免疫沉淀(“一步法 ChIP”),實(shí)際處理時(shí)間不到 15 分鐘。
- 96 孔板形式使檢測(cè)更加靈活。 (a) 手動(dòng),每次 1 次反應(yīng);或 (b) 每次 96 個(gè)反應(yīng)的高通量。
- 高效富集。 陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照的富集率> 200,所需的細(xì)胞數(shù)量極低(每次 ChIP 反應(yīng)低至 5,000 個(gè)細(xì)胞)。
- 高重現(xiàn)性。預(yù)先優(yōu)化的 ChIP 條件和 EpiSonic 1000 在密封容器中進(jìn)行數(shù)字聲控反應(yīng)處理,使 ChIP 程序保持一致。
- 廣泛的下游分析兼容性。 兼容各種下游分析工作流程,包括 ChIP-PCR、ChIP-on-chip 和 ChIP-seq。
原理和程序
ChromaFlash?一步磁性ChIP試劑盒包含了直接從哺乳動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離的染色質(zhì)提取物中成功進(jìn)行染色質(zhì)免疫沉淀所需的所有必要試劑。該試劑盒包括陽(yáng)性對(duì)照抗體(RNA 聚合酶 II)、陰性對(duì)照非免疫 IgG 和 GAPDH 引物,可用作陽(yáng)性對(duì)照,以證明試劑盒試劑和實(shí)驗(yàn)步驟的功效。RNA 聚合酶 II 被認(rèn)為在 GAPDH 基因啟動(dòng)子中富集,預(yù)計(jì)該基因啟動(dòng)子將在大多數(shù)生長(zhǎng)中的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,并且可以被 RNA 聚合酶 II 免疫沉淀,但不能被非免疫 IgG 免疫沉淀。然后對(duì)免疫沉淀的 DNA 進(jìn)行純化、釋放和洗脫。洗脫的 DNA 可用于各種下游應(yīng)用,如 ChIP-PCR、ChIP-on-chip 和 ChIP-seq。


