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BACTH System Kit， EUK001/細菌雙雜交系統(tǒng)試劑盒（腺苷酸環(huán)化酶）
日期：2025-11-09 18:06
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摘要：
Euromedex 細菌雙雜交（BACTH, “細菌腺苷酸環(huán)化酶雙雜交”）系統(tǒng)是檢測和表征體內蛋白質-蛋白質相互作用的一個簡單又快速的方法。
與需要專業(yè)知識的酵母菌雙雜交系統(tǒng)相比，BACTH 提供與大腸桿菌一起工作的所有優(yōu)點。
易達到的的微生物學和分子生物學技術（質粒制備，轉化效率，PCR ...）
它利用了來自百日咳桿菌的腺苷酸環(huán)化酶的催化結構域（CyaA），由兩個互補片段 T25 andT18 組成的這個事實，當物理分離時不起作用。
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Euromedex 細菌雙雜交（BACTH, “細菌腺苷酸環(huán)化酶雙雜交”）系統(tǒng)是檢測和表征體內蛋白質-蛋白質相互作用的一個簡單又快速的方法。
與需要專業(yè)知識的酵母菌雙雜交系統(tǒng)相比，BACTH 提供與大腸桿菌一起工作的所有優(yōu)點。
易達到的的微生物學和分子生物學技術（質粒制備，轉化效率，PCR ...）
它利用了來自百日咳桿菌的腺苷酸環(huán)化酶的催化結構域（CyaA），由兩個互補片段 T25 andT18 組成的這個事實，當物理分離時不起作用。
當這兩個片段融合到相互作用的多肽時，X 和 Y，這些雜交蛋白的異二聚化導致 T25 和 T18片段之間的功能互補，因此導致 cAMP 合成。
通過重構的嵌合酶產(chǎn)生的環(huán) AMP 與分解代謝激活蛋白 CAP 結合。 cAMP / CAP 復合物是大腸桿菌中基因轉錄的多效調節(jié)劑。 它打開了幾個常駐基因的表達，包括參與乳糖和麥芽糖分解代謝的 lac 和 mal 操縱子的基因。
因此，細菌能夠利用乳糖或麥芽糖作為獨特的碳源，并且可以在指示劑或選擇性培養(yǎng)基上容易地區(qū)分。
試劑盒的成分：
BACTH 菌株
BTH101, LB/DMSO 儲備液（BACTH 測定報告菌株）1 ml EUB001
DHM1, LB/DMSO 儲備液（BACTH 測定報告菌株）1 ml EUB002
BACTH 向量pKNT25，超螺旋，10μg（0.5μg/μlTE 緩沖液）20μlEUP-25N
pKT25，超螺旋，10μg（0.5μg/μl，在 TE 緩沖液中）20μlEUP-25C
pUT18，超螺旋，10μg（0.5μg/μl，在 TE 緩沖液中）20μlEUP-18N
pUT18C，超螺旋，10μg（0.5μg/μl，在 TE 緩沖液中）20μlEUP-18C
對照質粒
pKT25-zip，超螺旋，1μg（0.05μg/μl，在 TE 緩沖液中）20μlEUP-25Z
pUT18C-zip，超螺旋，1μg（0.05μg/μl，在 TE 緩沖液中）20μlEUP-18Z
儲存于-20°C
系統(tǒng)試劑盒已經(jīng)由 D. Ladant 博士小組在巴斯德研究所(Karimova et al., 1998, Proc. Natl. Acad.Sci. U.S.A. 95:5752).開發(fā)。
