- 如果您對該產(chǎn)品感興趣的話，可以
- 產(chǎn)品名稱：質(zhì)粒超大量提取試劑盒（mega3）
- 產(chǎn)品型號：PD1611-02
- 產(chǎn)品展商：Biomiga
- 產(chǎn)品價格：0.00 元
- 折扣價格：0.00 元
- 產(chǎn)品文檔：無相關(guān)文檔
- 發(fā)布時間：2018-09-12
- 在線詢價
簡單介紹
質(zhì)粒超大量提取試劑盒（mega3）（Plasmid ezFilter Megaprep 3 Kit ）采用獨特的雙層膜過濾法，整個過程無需離心，可在60分鐘內(nèi)純化到3-4 mg高拷貝質(zhì)粒。
產(chǎn)品描述
質(zhì)粒超大量提取試劑盒（mega3）（Plasmid ezFilter Megaprep 3 Kit ）可在60分鐘內(nèi)純化到3-4mg高拷貝質(zhì)粒。
質(zhì)粒超大量提取試劑盒（mega3）組分：
|
Catalog#
|
PD1611-02
|
|
Preps
|
10
|
|
DNA Unit
|
10
|
|
Filter Unit
|
10
|
|
Replacement Cup
|
10
|
|
Buffer A1
|
350 mL
|
|
Buffer B1
|
350 mL
|
|
Buffer C1
|
380 mL
|
|
Buffer KB
|
530 mL
|
|
RNase A (20 mg/mL)
|
35 mg(1.75 mL)
|
|
Elution Buffer
|
200 mL
|
|
User Manual
|
1
|
保存條件：
RNAse A在4℃下可以保存一年，Buffer A1加入RNase A 后4℃保存，其它組分室溫保存。
注意事項：
1、質(zhì)?？截悢?shù)：純化中低拷貝的質(zhì)粒時，使用2倍的菌液體積，2倍的Buffer A1,B1,C1,100%乙醇，相同體積的Wash Buffer (70% 乙醇)和Elution Buffer.
2、轉(zhuǎn)化菌：若為-70oC甘油凍存的菌，請先涂布平板培養(yǎng)后，再重新挑選新的單個菌落進(jìn)行培養(yǎng)。
3、柱結(jié)合能力：3mg
質(zhì)粒超大量提取試劑盒（mega3）操作簡明步驟：
1、取500 µL新鮮的菌液接種到 500 mL (勿超過 500 mL)的LB培養(yǎng)基（含適量***），37oC震蕩培養(yǎng)14-16小時。室溫下5,000 x g離心10分鐘，收集菌體，并盡可能的吸去上清。
2、加入30 mL Buffer A1（確保已加入RNase A），用移液器或渦流震蕩確保**沉淀重新懸浮。
3、加入 30 mL Buffer B1, 輕輕地反轉(zhuǎn)5-10 次以混合均勻，然后靜置2-5分鐘至溶液粘稠而澄清。
4、加入 36 mL Buffer C1,立即反轉(zhuǎn)幾次至出現(xiàn)絮狀白色沉淀。渦漩震蕩10 秒。充分混勻后，溶液將會變得顏色均一，如果此時溶液顏色不均一，均局部顏色過深，建議將溶液輕甩幾次，以充分混合溶液，室溫下靜置10分鐘。
5、將雙層Filter unit與500ml或100ml的**瓶(Corning# 430518 or 430282 or equivalent) 連接，旋緊，再將此裝置與真空負(fù)壓裝置連接。
6、先將步驟“5”中底部較澄清的裂解產(chǎn)物用50 mL移液管轉(zhuǎn)移至雙層Filter unit中，靜置5分鐘后打開真空裝置，使負(fù)壓由低到高，5分鐘后增至*大（0.04 Mpa）。
7、當(dāng)大部分裂解液已被過濾時，關(guān)掉真空負(fù)壓裝置，等候1分種，拆卸裝置，移去雙層Filter unit。
8、再將DNA unit杯與一個新的**的500ml或1000ml螺口標(biāo)準(zhǔn)瓶連接，旋緊。并將過濾嘴與真空負(fù)壓裝置連接。將步驟“7”中收集到的裂解液中加入36 ml 100%乙醇，立即混合均勻，立即將一半倒入DNA unit杯中，開啟負(fù)壓裝置，進(jìn)行過濾吸附操作。
9、再將剩下一半倒入DNA unit杯中，當(dāng)所有裂解液已過濾完，再維持真空1分鐘后，關(guān)掉負(fù)壓裝置。
10、在DNA Unit杯中加入50 mL Buffer KB，開啟負(fù)壓裝置至*大（0.04Mpa）并維持1分鐘，使Buffer KB完全通過DNA Unit杯。
11、在DNA Unit杯中加入50 mL 70%乙醇，開啟負(fù)壓裝置至*大（0.04Mpa）并維持1分鐘，使乙醇完全通過DNA Unit杯。重復(fù)此操作步驟一次。
12、在DNA Unit杯中加入50 mL無水乙醇，開啟*大負(fù)壓維持1分鐘，關(guān)掉負(fù)壓裝置，倒掉瓶子中的廢液，將DNA Unit杯重新連接至標(biāo)準(zhǔn)瓶上，開啟負(fù)壓裝置至*大負(fù)壓，真空抽20分鐘，以充分去除殘留的乙醇。
13、關(guān)掉負(fù)壓裝置，靜置一分鐘，移去標(biāo)準(zhǔn)瓶，將DNA Unit 連接至一個新的50 mL的離心管中，并旋緊。
14、加入10 mL ** ddH2O或者Elution Buffer到DNA Unit杯的膜上，室溫放置2分鐘，打開負(fù)壓裝置至*大（0.04 Mpa）洗脫DNA。此時會收集到3~5 mＬ洗脫液，這是1st 洗脫液。
15、關(guān)掉負(fù)壓裝置，將DNA Unit連接至一個新的50mL的離心管中，加入5 mL ** ddH2O或者Elution Buffer到DNA Unit杯的膜上，室溫靜置2分鐘，開啟負(fù)壓裝置至*大（0.04 Mpa）洗脫DNA。此時會收集到約3 mL洗脫液，這是2nd洗脫液。
質(zhì)粒超大量提取試劑盒（mega3）操作流程：
- 溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險，建議您在購買前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
- 免責(zé)申明：以上內(nèi)容為注冊會員自行發(fā)布，若信息的真實性、合法性存在爭議，平臺將會監(jiān)督協(xié)助處理，歡迎舉報
