- 如果您對該產(chǎn)品感興趣的話，可以
- 產(chǎn)品名稱：過濾法質(zhì)粒大量提取試劑盒
- 產(chǎn)品型號：PD1512-02
- 產(chǎn)品展商：Biomiga
- 產(chǎn)品價格：0.00 元
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- 產(chǎn)品文檔：無相關(guān)文檔
- 發(fā)布時間：2018-08-08
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簡單介紹
過濾法質(zhì)粒大量提取試劑盒（Plasmid ezFilter Maxiprep Kit）在離心法質(zhì)粒中量提取試劑盒基礎(chǔ)上開發(fā)的快速過濾法提取試劑盒，采用特殊的過濾裝置，直接過濾細胞裂解液，收集上清?？稍?5分鐘內(nèi)從100~250mL菌液中提取到高達1mg高拷貝質(zhì)粒DNA。
產(chǎn)品描述
過濾法質(zhì)粒大量提取試劑盒（Plasmid ezFilter Maxiprep Kit）可在45分鐘內(nèi)從100~250mL菌液中提取到高達1mg高拷貝質(zhì)粒DNA。
過濾法質(zhì)粒大量提取試劑盒組分：
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Catalog#
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PD1512-00
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PD1512-01
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PD1512-02
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Preps
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2
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10
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25
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ezBindTM Columns
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2
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10
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25
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Filter syringe
(60 mL)
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2
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10
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25
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Buffer A1
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22 mL
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110 mL
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270 mL
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Buffer B1
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22 mL
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110 mL
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270 mL
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Buffer C1
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27 mL
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135 mL
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330 mL
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RNase A
(20 mg/mL)
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2.2 mg
(110 µL)
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11 mg
(550 µL)
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27 mg
(1.35 µL)
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Elution Buffer
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6 mL
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30 mL
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60 mL
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User Manual
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1
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1
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1
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保存條件：
RNAse A在4℃下可以保存一年，Buffer A1加入RNase A 后4℃保存，其它組分室溫保存。
注意事項：
1、質(zhì)?？截悢?shù)：純化中低拷貝的質(zhì)粒時，使用2倍的菌液體積，2倍的Buffer A1,B1,C1,100%乙醇，相同體積的Wash Buffer (70% 乙醇)和Elution Buffer.
2、轉(zhuǎn)化菌：若為-70oC甘油凍存的菌，請先涂布平板培養(yǎng)后，再重新挑選新的單個菌落進行培養(yǎng)。
3、柱結(jié)合能力：1mg
過濾法質(zhì)粒大量提取試劑盒操作簡明步驟：
1、取100 µL新鮮的菌液接種到150-200 mL (勿超過 200 mL)的LB培養(yǎng)基（含適量***），37oC震蕩培養(yǎng)14-16小時。室溫下5,000 x g離心10分鐘，收集菌體，并盡可能的吸去上清。
2、加入10 mL Buffer A1（確保已加入RNase A），用移液器或渦流震蕩確保**沉淀重新懸浮。
3、加入 10 mL Buffer B1, 輕輕地反轉(zhuǎn)5-10 次以混合均勻，然后靜置2-5分鐘至溶液粘稠而澄清。
4、加入12 mL Buffer C1, 立即反轉(zhuǎn)5次，用手用力搖晃3-5次充分混勻，此時出現(xiàn)白色絮狀沉淀。
5、將裂解液轉(zhuǎn)移至過濾器中，放在一個50mL的試管上靜置10分鐘。管中的白色絮狀沉淀浮上來，對準50mL的管向下壓，使裂解液盡可能多的通過，有些裂解液可能會殘留在沉淀中。注：靜置10分鐘時RNase A將工作，排除RNA污染。
6、加入12 mL 100% 乙醇，立即混勻，需馬上離心過DNA柱。
7、立即轉(zhuǎn)移20 mL裂解液/收集管至帶收集管的DNA柱中，室溫下> 2,500 x g 離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將離心柱重新放回到收集管中。重復(fù)此步直至所有的溶液通過DNA柱。
8、向離心柱中加入10mL 70%乙醇，室溫下>2,500 x g 離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將離心柱重新放回到收集管中。重復(fù)步驟“9”。
9、將離心柱放回高速離心機中，室溫下>2,500 x g 開蓋離心10分鐘，以徹底去除殘留的乙醇。
10、將離心柱轉(zhuǎn)至一個新的50 mL離心管中，向DNA柱膜的正中加入1-1.5 mL**ddH2O（pH在7.0-8.5之間）或Elution Buffer，室溫放置1分鐘，5,000 x g離心5分鐘，以洗脫質(zhì)粒DNA。若想提高得率，將50 mL離心管中的洗脫液再加到柱的中間，5,000 x g離心5分鐘以洗脫質(zhì)粒DNA。
過濾法質(zhì)粒大量提取試劑盒操作流程：
- 溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險，建議您在購買前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
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