- 如果您對(duì)該產(chǎn)品感興趣的話,可以
- 產(chǎn)品名稱(chēng):質(zhì)粒大量提取試劑盒
- 產(chǎn)品型號(hào):PD1511-02
- 產(chǎn)品展商:Biomiga
- 產(chǎn)品價(jià)格:0.00 元
- 折扣價(jià)格:0.00 元
- 產(chǎn)品文檔:無(wú)相關(guān)文檔
- 發(fā)布時(shí)間:2018-08-29
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簡(jiǎn)單介紹
質(zhì)粒大量提取試劑盒(Plasmid Maxiprep Kit)采用離心柱高效專(zhuān)一吸附DNA技術(shù),可在60分鐘內(nèi)從100~250 mL菌液中提取到高達(dá)1 mg高拷貝質(zhì)粒DNA。
產(chǎn)品描述
質(zhì)粒大量提取試劑盒(Plasmid Maxiprep Kit)可在60分鐘內(nèi)從100~250mL菌液中提取到高達(dá)1mg高拷貝質(zhì)粒DNA。
質(zhì)粒大量提取試劑盒組分:
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Catalog#
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PD1511-00
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PD1511-01
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PD1511-02
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Preps
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2
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10
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25
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ezBindTM Columns
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2
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10
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25
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Buffer A1
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22 mL
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110 mL
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270 mL
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Buffer B1
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22 mL
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110 mL
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270 mL
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Buffer C1
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27 mL
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135 mL
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330 mL
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RNase A
(20 mg/mL)
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2.2 mg
(110 µL)
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11 mg
(550 µL)
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27 mg
(1.35 µL)
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Elution Buffer
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6 mL
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30 mL
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60 mL
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User Manual
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1
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1
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1
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保存條件:
RNAse A在4℃下可以保存一年,Buffer A1加入RNase A 后4℃保存,其它組分室溫保存。
注意事項(xiàng):
1、質(zhì)??截悢?shù):純化中低拷貝的質(zhì)粒時(shí),使用2倍的菌液體積,2倍的Buffer A1,B1,C1,100%乙醇,相同體積的Wash Buffer (70% 乙醇)和Elution Buffer。.
2、轉(zhuǎn)化菌:若為-70oC甘油凍存的菌,請(qǐng)先涂布平板培養(yǎng)后,再重新挑選新的單個(gè)菌落進(jìn)行培養(yǎng)。
3、柱結(jié)合能力:1mg
質(zhì)粒大量提取試劑盒操作簡(jiǎn)明步驟:
1、取100 µL新鮮的菌液接種到150-200 mL (勿超過(guò) 200 mL)的LB培養(yǎng)基(含適量***),37oC震蕩培養(yǎng)14-16小時(shí)。室溫下5,000 x g離心10分鐘,收集菌體,并盡可能的吸去上清。
2、加入10 mL Buffer A1(確保已加入RNase A),用移液器或渦流震蕩確保**沉淀重新懸浮。
3、加入 10 mL Buffer B1, 輕輕地反轉(zhuǎn)5-10 次以混合均勻,然后靜置2-5分鐘至溶液粘稠而澄清。
4、加入12 mL Buffer C1, 立即反轉(zhuǎn)5次,用手用力搖晃3-5次充分混勻,此時(shí)出現(xiàn)白色絮狀沉淀。
5、將離心管轉(zhuǎn)至高速離心機(jī),在室溫下14,000 x g 離心10分鐘(若上清中有白色沉淀,可再次離心)。
6、小心吸取離心后的上清液至15 mL管中(避免吸起沉淀),加入12 mL 100% 乙醇,立即搖勻,需馬上離心過(guò)DNA柱。
7、立即轉(zhuǎn)移20 mL裂解液/收集管至帶收集管的DNA柱中,室溫下> 2,500 x g 離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將離心柱重新放回到收集管中。重復(fù)此步直至所有的溶液通過(guò)DNA柱。
8、向離心柱中加入10 mL 70% 乙醇,室溫下>2,500 x g 離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將離心柱重新放回到收集管中。重復(fù)步驟“9”。
9、將離心柱放回高速離心機(jī)中,室溫下>2,500 x g 開(kāi)蓋離心10分鐘,以徹底去除殘留的乙醇。
10、將離心柱轉(zhuǎn)至一個(gè)新的50 mL離心管中,向DNA柱膜的正中加入1-1.5 mL**ddH2O(pH在7.0-8.5之間)或Elution Buffer,室溫放置1分鐘,5,000 x g離心5分鐘,以洗脫質(zhì)粒DNA。若想提高得率,將50 mL離心管中的洗脫液再加到柱的中間,5,000 x g離心5分鐘以洗脫質(zhì)粒DNA。
質(zhì)粒大量提取試劑盒操作流程:

- 溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買(mǎi)風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買(mǎi)前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
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