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主營(yíng):仿德國(guó)sarstedt可立底螺口管、5ml~1000ml耐高溫高壓防漏廣口塑料試劑瓶、5ml~1000ml耐高溫高壓防漏小口塑料試劑瓶、棕黑色避光塑料試劑瓶、水質(zhì)采樣瓶、化工試劑包裝瓶、液氮冷凍管、巴氏吸管、紙質(zhì)塑料凍存盒冷凍盒、液氮凍存盒、無(wú)酶無(wú)熱源低吸附濾芯吸頭、細(xì)胞刮刀、細(xì)胞鏟、細(xì)胞過(guò)濾篩網(wǎng)、不銹鋼細(xì)胞篩網(wǎng)、5L塑料瓶、10L塑料瓶、塑料組培瓶等
021-38710766
企業(yè)信息
14
  • 入駐時(shí)間:2011-07-06
  • 聯(lián)系人:銷(xiāo)售部
  • 電話:021-38710766
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產(chǎn)品詳情

質(zhì)粒大量提取試劑盒

  • 如果您對(duì)該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱(chēng):質(zhì)粒大量提取試劑盒
  • 產(chǎn)品型號(hào):PD1511-02
  • 產(chǎn)品展商:Biomiga
  • 產(chǎn)品價(jià)格:0.00 元
  • 折扣價(jià)格:0.00 元
  • 產(chǎn)品文檔:無(wú)相關(guān)文檔
  • 發(fā)布時(shí)間:2018-08-29
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簡(jiǎn)單介紹
質(zhì)粒大量提取試劑盒(Plasmid Maxiprep Kit)采用離心柱高效專(zhuān)一吸附DNA技術(shù),可在60分鐘內(nèi)從100~250 mL菌液中提取到高達(dá)1 mg高拷貝質(zhì)粒DNA。
產(chǎn)品描述

質(zhì)粒大量提取試劑盒(Plasmid Maxiprep Kit)可在60分鐘內(nèi)從100~250mL菌液中提取到高達(dá)1mg高拷貝質(zhì)粒DNA。

質(zhì)粒大量提取試劑盒組分:

Catalog#
PD1511-00
PD1511-01
PD1511-02
Preps
2
10
25
ezBindTM Columns
2
10
25
Buffer A1
22 mL
110 mL
270 mL
Buffer B1
22 mL
110 mL
270 mL
Buffer C1
27 mL
135 mL
330 mL
RNase A
(20 mg/mL)
2.2 mg
(110 µL)
11 mg
(550 µL)
27 mg
(1.35 µL)
Elution Buffer
6 mL
30 mL
60 mL
User Manual
1
1
1

保存條件:
RNAse A在4℃下可以保存一年,Buffer A1加入RNase A 后4℃保存,其它組分室溫保存。

注意事項(xiàng):
1、質(zhì)??截悢?shù):純化中低拷貝的質(zhì)粒時(shí),使用2倍的菌液體積,2倍的Buffer A1,B1,C1,100%乙醇,相同體積的Wash Buffer (70% 乙醇)和Elution Buffer。.
2、轉(zhuǎn)化菌:若為-70oC甘油凍存的菌,請(qǐng)先涂布平板培養(yǎng)后,再重新挑選新的單個(gè)菌落進(jìn)行培養(yǎng)。
3、柱結(jié)合能力:1mg

質(zhì)粒大量提取試劑盒操作簡(jiǎn)明步驟:
1、取100 µL新鮮的菌液接種到150-200 mL (勿超過(guò) 200 mL)的LB培養(yǎng)基(含適量***),37oC震蕩培養(yǎng)14-16小時(shí)。室溫下5,000 x g離心10分鐘,收集菌體,并盡可能的吸去上清。
2、加入10 mL Buffer A1(確保已加入RNase A),用移液器或渦流震蕩確保**沉淀重新懸浮。
3、加入 10 mL Buffer B1, 輕輕地反轉(zhuǎn)5-10 次以混合均勻,然后靜置2-5分鐘至溶液粘稠而澄清。
4、加入12 mL Buffer C1, 立即反轉(zhuǎn)5次,用手用力搖晃3-5次充分混勻,此時(shí)出現(xiàn)白色絮狀沉淀。
5、將離心管轉(zhuǎn)至高速離心機(jī),在室溫下14,000 x g 離心10分鐘(若上清中有白色沉淀,可再次離心)。
6、小心吸取離心后的上清液至15 mL管中(避免吸起沉淀),加入12 mL 100% 乙醇,立即搖勻,需馬上離心過(guò)DNA柱。
7、立即轉(zhuǎn)移20 mL裂解液/收集管至帶收集管的DNA柱中,室溫下> 2,500 x g 離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將離心柱重新放回到收集管中。重復(fù)此步直至所有的溶液通過(guò)DNA柱。
8、向離心柱中加入10 mL 70% 乙醇,室溫下>2,500 x g 離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將離心柱重新放回到收集管中。重復(fù)步驟“9”。
9、將離心柱放回高速離心機(jī)中,室溫下>2,500 x g 開(kāi)蓋離心10分鐘,以徹底去除殘留的乙醇。
10、將離心柱轉(zhuǎn)至一個(gè)新的50 mL離心管中,向DNA柱膜的正中加入1-1.5 mL**ddH2O(pH在7.0-8.5之間)或Elution Buffer,室溫放置1分鐘,5,000 x g離心5分鐘,以洗脫質(zhì)粒DNA。若想提高得率,將50 mL離心管中的洗脫液再加到柱的中間,5,000 x g離心5分鐘以洗脫質(zhì)粒DNA。

質(zhì)粒大量提取試劑盒操作流程:

  
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