Plasmid Miniprep Kit II質(zhì)粒小量提取試劑盒II注意事項：
1、使用前請將適量乙醇加入DNA Wash Buffer，令乙醇終濃度為80%；
2、純化中低拷貝的質(zhì)粒時，使用2倍的菌液體積，2倍的Buffer A1,B1,N1, 相同體積的Wash Buffer和Elution Buffer；
3、若為-70oC甘油凍存的菌，請先涂布平板培養(yǎng)后，再重新挑選新的單個菌落進行培養(yǎng)；
4、若用于提取1-4 mL的菌落，請將Buffer A1, B1, N1的量降低至250 µL, 250 µL 及 350 µL，DNA wash Buffer及Elution Buffer的量不變。
操作步驟： 1、接種新鮮的單個菌落到5-12 mL的LB培養(yǎng)基（含適量***），37^oC震蕩培養(yǎng)14-16小時（勿超過16小時）。室溫下10,000 rpm離心1分鐘，收集菌體，并盡可能的吸去上清。
2、加入450 µL Buffer A1（確保已加入RNase A），用移液器或渦流震蕩充分懸浮**細胞。
3、加入 450 µL Buffer B1, 輕輕地反轉(zhuǎn)多次至溶液充分混勻，室溫靜置2-5分鐘至溶液粘稠而澄清。
4、加入550 µL Buffer N1, 立即反轉(zhuǎn)多次，至溶液充分混勻，此時出現(xiàn)白色絮狀沉淀。
5、將離心管轉(zhuǎn)至高速離心機，在室溫下13,000 rpm離心10分鐘（若上清中有白色沉淀，可再次離心）。
6、小心吸取700 µL離心后的上清液至帶有收集管的DNA柱中（避免吸起沉淀），室溫下13,000 rpm 離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將離心柱重新放回到收集管中。重復步驟“7”至全部上清離心過DNA柱。
7、可選: 向DNA柱中加入 500 µL Buffer KB, 室溫下13,000 rpm 離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將離心柱重新放回到收集管中。
8、向離心柱中加入650 µL DNA Wash Buffer（確保已加入無水乙醇），室溫下，13,000 rpm 離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將離心柱重新放回到收集管中。重復步驟“8”。
9、將離心柱放回高速離心機中，13,000 rpm室溫下開蓋離心2分鐘，以徹底去除殘留的乙醇。
10、將離心柱轉(zhuǎn)至一個新的1.5 mL離心管中，向DNA柱的正中間加入100~150 µL（體積>100 µL）的ddH₂O（pH在7.0-8.5之間）或Elution Buffer，室溫放置2分鐘，13,000 rpm 離心1分鐘，洗脫質(zhì)粒DNA。將洗脫液再加到柱的中間，13,000 rpm 離心1分鐘，洗脫質(zhì)粒DNA。

Plasmid Miniprep Kit II質(zhì)粒小量提取試劑盒II操作流程：