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- 產(chǎn)品名稱：Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield )
- 產(chǎn)品型號：100U
- 產(chǎn)品展商：其他品牌
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- 發(fā)布時間：2018-06-27
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簡單介紹
Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 具有5’ → 3’DNA 聚合成活性和3’→ 5’ 外切核酸（校正）活性，是升級改進的Pyrococcus 類DNA 聚合酶，通過在其羧基端融合特殊 Enhancing Domain 蛋白，有效地提高了持續(xù)合成能力和抗逆性
產(chǎn)品貨號：
CED0031
產(chǎn)品規(guī)格：
100U
產(chǎn)品描述
Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 具有5’ → 3’DNA 聚合成活性和3’→ 5’ 外切核酸（校正）活性，是升級改進的Pyrococcus 類DNA 聚合酶，通過在其羧基端融合特殊 Enhancing Domain 蛋白，有效地提高了持續(xù)合成能力和抗逆性。使用10×Platinum HiProof Taq PCR Buffer 進行PCR 時，DNA合成的錯配率約為1.2 x 10-6 errors per nt per cycle，具備良好的保真性能，是目前保真率*高的DNA 聚合酶之一。Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield )，無末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶活性，PCR 產(chǎn)物末端為平末端。配合5×GC Buffer Ⅰ或 5×GC Buffer Ⅱ使用，可顯著增強復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)DNA 模板以及高GC含量DNA 模板的擴增效果。較強的抗逆能力，能夠以人血液為模板，直接擴增血液基因組DNA
產(chǎn)品特點
■ 熱穩(wěn)定性：94℃ 保持120 min 后仍具有50% 的活性；
■ 合成能力：催化5’ → 3’ DNA 合成，通過優(yōu)化PCR 條件，以λ DNA 為模板*高可擴增10 kb DNA 條帶；在配套的5×GC Buffer Ⅰ或 5×GC Buffer Ⅱ的協(xié)助下，Platinum HiProof Taq( HiGC & HiYield ) 能有效催化GC 含量高達85% 的DNA 模板的擴增；
■ 外切核酸活性：具備很高的3’ → 5’ 外切核酸（校正）活性，無可檢測水平5’ → 3’ 核酸外切酶活性；
■ 高保真性：源自其3’ → 5’ 外切核酸（校正）活性以及特殊的增強肽段，該酶具有極高保真度，大約是普通Taq DNA Polymerase 的15 倍；
■dUTP、dITP 及包含這兩種核苷酸的引物不能用于Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 參與的PCR。
■ 高擴增速度：擴增片段長度＜ 2 kb，Platinum HiProof Taq( HiGC & HiYield ) 的延伸速度為2 kb/min；＞ 2 kb 的片段，其延伸速度為0.5-1 kb/min。
應(yīng)用
普通PCR、高保真PCR、復(fù)雜DNA 片段PCR、高GC含量模板PCR、平末端載體構(gòu)建PCR、菌落PCR、定點突變PCR。
質(zhì)量控制
■ 內(nèi)切核酸酶檢測：無可檢測水平的內(nèi)切核酸酶污染；
■ 熱穩(wěn)定性：37℃保持21 天酶活性無明顯降低。
濃度
2 U/μL，100 U/管
來源
E.coli 表達重組Pyrococcus furiosus DNA 聚合酶基因。
儲存條件
保存（運輸）溫度：-20℃
活性單位定義
1 個活性單位定義為70℃反應(yīng)30 min，將10 nmol dNTPs合成多聚核苷酸（吸附于吸附柱DE-81）所需的酶量。
酶活性分析混合物：67 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 6.7 mM MgCl2, 1 mM 2-
巰基乙醇, 50 mM NaCl, 0.1 mg/mL BSA, 0.75 mM 活化鮭精DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/mL [3H]-dTTP。
抑制和失活
■ 低濃度尿素、甲酰胺、二甲基甲酰胺和DMSO 對Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 酶活性無明顯抑制作用；
■ 離子型去污劑脫氧膽酸鈉(>0.06%)、十二烷基肌氨酸鈉（>0.02%）、SDS(>0.01%)， 非離子型去污劑Tween20(>5%)、 Nonidet-P40 (>5%)、 Triton X-100 (>5% ) 對Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 酶活性具有抑制效果；
■ 酚/ 氯仿抽提可使Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 失活。
儲存緩沖液
Storage Buffer
50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM KCl, 0.1 mM EDTA,1 mM
dTT, 0.5%(v/v) Nonidet-P40, 0.5%(v/v) Tween-20, 50%(v/v)
Glycerol。
10×Platinum HiProof Taq PCR Buffer ( without Mg2+)
200 mM Tris-HCl (pH 8.8), 100 mM (NH4)2SO4, 100 mM KCl,
1 mg/mL BSA, 1% (v/v) TritonX-100。
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