在感染性Disease的診斷方面PCR技術(shù)在感染性Disease中尤其適用于檢測一些培養(yǎng)周期長或缺乏穩(wěn)定可靠檢測手段的病原體。PCR的模板可以是DNA,也可以是RNA。模板的取材主要依據(jù)PCR的擴增對象,可以是病原體標本如病毒等。標本處理的基本要**除去雜質(zhì),并部分純化標本中的核酸。多數(shù)樣品需要經(jīng)過SDS和蛋白酶K處理。難以破碎的菌類,可用溶菌酶加EDTA處理。所得到的粗制DNA,經(jīng)酚、氯仿抽提純化,再用乙醇沉淀后用作PCR反應模板。
PCR檢測儀是用于新冠病毒核酸檢測的關(guān)鍵設備,核酸檢測是根據(jù)病毒的基因序列配制出相對應的引物和探針,利用PCR檢測儀對待測樣本進行擴增。
近日,河南計量院研制出無線傳輸分體式PCR檢測儀校準裝置,基于自行設計的多通道溫度檢測模塊,應用無線傳輸技術(shù)實現(xiàn)數(shù)據(jù)采集分析,設計指標滿足《JJF 1527-2015 聚合酶鏈反應分析儀校準規(guī)范》的要求。只需將該裝置的檢測模塊置入待校準的PCR檢測儀中,工作人員無需進入實驗室內(nèi)部,即可對儀器進行校準,不但能夠節(jié)約PCR檢測實驗室的管理運行成本和寶貴的防護資源,還能極大降低計量人員本身的感染風險,具有較好的推廣應用價值。
無線傳輸
是利用無線技術(shù)進行數(shù)據(jù)傳輸?shù)囊环N方式。無線傳輸和有線傳輸是對應的。隨著無線技術(shù)的日益發(fā)展,無線傳輸技術(shù)應用越來越被各行各業(yè)所接受。無線圖像傳輸作為一個特殊使用方式也逐漸被廣大用戶看好。其安裝方便、靈活性強、性價比高等特性使得更多行業(yè)的監(jiān)控系統(tǒng)采用無線傳輸方式,建立被監(jiān)控點和監(jiān)控中心之間的連接。
無線傳輸分為:
1、模擬微波傳輸就是把視頻信號直接調(diào)制在微波的信道上(微波發(fā)射機,HD-630),通過天線(HD-1300LXB)發(fā)??出去,監(jiān)控中心通過天線接收微波信號,然后再通過微波接收機解調(diào)出原來的視頻信號。
2、數(shù)字微波傳輸就是先把視頻編碼壓縮(HD-6001D),然后通過數(shù)字微波(HD-9500)信道調(diào)制,再通過天線發(fā)射出去,接收端則相反,天線接收信號,微波解擴,視頻解壓縮,臨了還原模擬的視頻信號,也可微波解擴后通過電腦安裝相應的解碼軟件,用電腦軟解壓視頻,而且電腦還支持錄像,回放,管理,云鏡控制,報警控制等功能;存儲服務器,配合磁盤陣列存儲;這種監(jiān)控方式圖像有720*576、352*288或更高的的分辨率選擇,通過解碼的存儲方式,視頻有0.2-0.8秒左右的延時。
數(shù)據(jù)采集分析
過軟硬件結(jié)合,可以記錄、顯示和分析眾多生命科學相關(guān)信號,可以完全代替?zhèn)鹘y(tǒng)的紙帶記錄儀、繪圖儀、XY繪圖儀、示波器和電壓計。把信號變成便于數(shù)字處理的形式,以減少數(shù)字處理的困難。無論計算機的容量和計算速度有多大,其處理的數(shù)據(jù)長度總是有限的,所以要把長時間的序列截斷。在截斷時,會引入一些誤差,所以有時要對截取的數(shù)字序列加權(quán),如有必要,還可用專門的程序進行數(shù)字濾波。然后把所得到的有限長的時間序列按照給定的程序進行運算。例如作時域中的概率統(tǒng)計、相關(guān)分析,頻域中的頻譜分析、功率譜分析、傳遞函數(shù)分析等。
數(shù)據(jù)采集分析應用領域包括:
血流動力學、離體組織灌流、離體器官、灌流、微血管張力測定系統(tǒng)、微循環(huán)血流測定(激光多普勒)、新陳代謝研究(運動生理學、心肺功能測定)、電生理系統(tǒng)(細胞內(nèi)、細胞外、電壓鉗)、超聲血流量測定、植入式生理信號(血壓、生物電、神經(jīng)干放電、體溫等)無線遙測、心理學、清醒動物血氧飽和度測定、人體無創(chuàng)血壓、心輸出量測定。
PCR檢測儀
是利用聚合酶鏈反應技術(shù)對特定DNA擴增的一種儀器設備,PCR技術(shù)的原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于靶序列兩端互補的寡核苷酸引物,由變性-退火-延伸三個基本反應步驟構(gòu)成。PCR的三個反應步驟反復進行,使DNA擴增量呈指數(shù)上升。反應*終的DNA擴增量可用y=(1+X)n計算。Y代表DNA片段擴增后的拷貝數(shù),X表示平均每次的擴增效率,n代表循環(huán)次數(shù)。平均擴增效率的理論值為100%,實際反應初期,靶序列DNA片段的增加呈指數(shù)形式,隨著PCR產(chǎn)物的逐漸積累,被擴增的DNA片段不再呈指數(shù)增加,而進入線性增長期或靜止期,即出現(xiàn)“停滯效應”,使平均效率達不到理論值。PCR擴增儀通常由熱蓋部件、熱循環(huán)部件、傳動部件、控制部件和電源部件等部分組成。被廣泛運用于醫(yī)學、生物學實驗室中,例如用于判斷檢體中是否會表現(xiàn)某遺傳Disease的圖譜、傳染病的診斷、基因復制以及親子鑒定等。
PCR檢測儀分類
PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實時熒光定量PCR儀四類。
熒光定量PCR儀光學校準方法
實時熒光定量PCR儀特異性更強,自動化程度更高,且有效地解決了PCR污染的問題,應用領域及應用量都不斷增加。但其設計更為復雜,溫度模塊和光學系統(tǒng)設計同時影響其性能和實驗準確性,為定量PCR儀校準帶來了巨大挑戰(zhàn)。采用生物試劑等方式對定量PCR儀熒光部分校準缺乏溯源性,無法分析誤差來源,存在較大缺陷。采用Cyclertest 3D optical定量PCR儀光學校準系統(tǒng)對ABI 7500 Fast Real-Time定量PCR儀的溫場部分和熒光系統(tǒng)進行了檢測并對檢測結(jié)果進行了分析,結(jié)果表明對溫度模塊和光學系統(tǒng)共同進行檢測并分析相關(guān)性能夠更科學地評估定量PCR儀性能,滿足定量PCR儀校準需求。