五味子為木蘭科植物五味子的干燥成熟果實(shí),是臨床常用中藥。五味子含量測定方法包括:二階導(dǎo)數(shù)紫外分光光度法、薄層色譜-比色法、薄層色譜-紫外分光光度法、薄層色譜、光密度法、高效液相色譜法等。下面我們介紹的是由LC-10ATVP高效液相色譜儀測定五味子含量的方法:
1)色譜條件色譜柱為DiamonsilC18柱(4.6mm×200mm,5μm);流動(dòng)相為甲醇-水(13∶7);流速1.0ml/min;柱溫30℃;檢測波長250nm。在此色譜條件下,五味子醇甲與其他雜質(zhì)峰完全達(dá)到分離(R﹥1.5),理論板數(shù)按五味子醇甲峰計(jì)在2000以上。
2)對照品溶液的制備取五味子醇甲對照品15mg,精密稱定,置50ml量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得(每毫升含五味子醇甲0.3mg)。
3)供試品溶液的制備取本品粉末(過3號篩)約0.25g,精密稱定,置20ml量瓶中,加甲醇約18ml超聲處理20min,取出,加甲醇至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。
4)檢測分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,在250nm處檢測。