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技術(shù)文章

**行為及條件性行為敏感化效應(yīng)及其個(gè)體差異
**行為及條件性行為敏感化效應(yīng)及其個(gè)體差異
摘　要　目的:考察**處理下,大鼠行為敏感化及條件性行為敏感化效應(yīng)及其個(gè)體差異性表現(xiàn)。方法:根據(jù)大鼠在初次抵達(dá)的新穎環(huán)境中水平活動(dòng)量的高低,將大鼠劃分為高反應(yīng)大鼠(High responder, HR)和低反應(yīng)大鼠(Lowresponder, LR)。應(yīng)用自動(dòng)監(jiān)測(cè)大鼠活動(dòng)箱,分別考察HR和LR大鼠在行為及條件性行為敏感化效應(yīng)形成及表達(dá)上的差異。結(jié)果: (1)連續(xù)5天**給藥,LR大鼠活動(dòng)量顯著升高, HR大鼠無(wú)此效應(yīng); (2)條件測(cè)試日(第6天) ,給藥與環(huán)境匹配大鼠,活動(dòng)量較給藥與環(huán)境非匹配組動(dòng)物和對(duì)照組動(dòng)物顯著為高;此效應(yīng)在HR和LR大鼠同時(shí)存在; (3)從給予**到給予鹽水LR大鼠活動(dòng)量顯著下降,而HR大鼠活動(dòng)量無(wú)顯著改變。結(jié)論:在連續(xù)給藥下,LR大鼠較HR大鼠,在行為敏感化效應(yīng)的形成中,具有更為顯著的效應(yīng),此效應(yīng)為L(zhǎng)R動(dòng)物對(duì)**更高的**效應(yīng),而非條件效應(yīng)所致。同時(shí)HR和LR大鼠都可以對(duì)**條件性線索產(chǎn)生應(yīng)答,產(chǎn)生條件性行為敏感化效應(yīng)。
關(guān)鍵詞　**,行為敏感化,條件性行為敏感化,個(gè)體差異。
1　引言
　　行為敏感化是成癮的重要行為反應(yīng),表現(xiàn)為在重復(fù)給藥下,動(dòng)物表現(xiàn)出越來(lái)越高的精神興奮性運(yùn)動(dòng)效應(yīng),這種越來(lái)越高的精神興奮性效應(yīng)的基礎(chǔ)是腦內(nèi)長(zhǎng)時(shí)程的神經(jīng)適應(yīng)性改變(neuroadapta2tion),這種改變被認(rèn)為是產(chǎn)生**依賴和依賴后復(fù)吸的生物學(xué)基礎(chǔ)。
　　應(yīng)用***、****、**、酒精等成癮**對(duì)大鼠進(jìn)行重復(fù)給藥處理,可以導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)行為敏感化效應(yīng),甚至在前處理(pretreatment)中只對(duì)動(dòng)物進(jìn)行一次性給藥處理,動(dòng)物在三周之后,依然可以出現(xiàn)行為敏感化效應(yīng)并伴隨以相應(yīng)的腦內(nèi)生化改變,例如在伏隔核(NucleusAccumbens, NAC)出現(xiàn)多巴胺(dopamine, DA)和乙酰膽堿神經(jīng)元的持續(xù)高反應(yīng)性。
　　在**成癮研究領(lǐng)域一個(gè)引人注目的事實(shí)是成癮行為效應(yīng)的個(gè)體差異。給予動(dòng)物同樣的**處理,應(yīng)用不同的行為學(xué)模型,例如自我給藥模型(Self- administration, SA)
,條件性位置偏愛(ài)模型(Conditionedplacepreference, CPP),精神運(yùn)動(dòng)興奮性模型(Locomotor activity, LA)等,都可以發(fā)現(xiàn)個(gè)體差異性的表現(xiàn)。
　　在以往關(guān)于行為敏感化及其個(gè)體差異的研究中,應(yīng)用**進(jìn)行行為敏感化個(gè)體差異研究的報(bào)告有限,而應(yīng)用**進(jìn)行條件性行為敏感化效應(yīng)個(gè)體差異的研究目前還未見(jiàn)報(bào)道。同時(shí)以往應(yīng)用精神興奮劑進(jìn)行的研究結(jié)果也呈現(xiàn)出一定的變異。例如Hooks等人發(fā)現(xiàn),通過(guò)動(dòng)物在初次抵達(dá)的新穎環(huán)境中水平活動(dòng)量的高低篩查出的高反應(yīng)大鼠(High
responders, HR)比低反應(yīng)大鼠(Low responders,LR)對(duì)****(AMPH)有著更為強(qiáng)烈的行為敏感化效應(yīng)。但是也有研究者發(fā)現(xiàn),LR大鼠的行為敏感化效應(yīng)更高。值得注意的是,上述研究結(jié)果都是在連續(xù)地給藥與環(huán)境相匹配的情況下獲得的,而在連續(xù)給藥和環(huán)境相匹配的情況下,動(dòng)物較高的活動(dòng)性可能同時(shí)存在著對(duì)**的無(wú)條件效應(yīng)和因給藥
與環(huán)境匹配而產(chǎn)生的激動(dòng)性條件反射的成分。實(shí)驗(yàn)在連續(xù)5天給予**的情況下,在第6天給予動(dòng)物鹽水,考察動(dòng)物活動(dòng)性的改變,以確定先天特征不同的大鼠,其對(duì)**和對(duì)給藥相關(guān)線索是否存在著差異性反應(yīng)。考慮到**類**在亞洲的濫用,其成癮機(jī)制和精神興奮劑的不同,以及**類**在臨床上使用的一定的必要性,我們選擇**作為研究使用的**。
　　研究有下列三個(gè)主要研究目的: (1)考察在行為敏感化建立的過(guò)程中,具有先天不同運(yùn)動(dòng)特征的HR和LR大鼠的行為敏感化效應(yīng); (2)考察**誘導(dǎo)的條件性行為敏感化行為的表達(dá)及此效應(yīng)在HR和LR大鼠間的異同; (3)考察HR和LR大鼠對(duì)**及**相關(guān)條件線索反應(yīng)的異同。
　　多數(shù)研究者認(rèn)為有**接觸史的動(dòng)物或人,在納絡(luò)酮催癮情況下,或者在自然戒斷情況下出現(xiàn)軀體戒斷癥狀,可被視為形成軀體依賴。在本實(shí)驗(yàn)所應(yīng)用的成癮**劑量及時(shí)程下,在所有時(shí)點(diǎn)及自然戒斷情況下,均未出現(xiàn)軀體戒斷癥狀,因此可以認(rèn)為,本實(shí)驗(yàn)中接觸成癮**的動(dòng)物并未形成軀體依賴狀態(tài)。
2　材料和方法
2. 1　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及藥品
　　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為雄性SD大鼠43只,起始體重400～480克(中國(guó)科學(xué)院遺傳研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供; 許可證號(hào): 199036)。動(dòng)物在50cm(長(zhǎng)) ×2215cm(寬) ×30cm(高)的不銹鋼籠中群居飼養(yǎng),每箱8只動(dòng)物,自由飲水進(jìn)食。光周期為8∶00(開(kāi))～20∶00(關(guān)),實(shí)驗(yàn)在光周期完成(10∶00～18∶00)。實(shí)驗(yàn)室溫度控制在20～22℃,相對(duì)濕度為40%左
右。正式實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,提前3天使動(dòng)物適應(yīng)實(shí)驗(yàn)主試人員的實(shí)驗(yàn)操作,排除非實(shí)驗(yàn)特異性的應(yīng)激因素。鹽酸**(Morphine HCL)由青海制藥廠提供,生理鹽水溶解,腹腔注射給藥(i. p. ),劑量為5mg/kg,**溶液及鹽水注射容量全部為1ml/kg。
2. 2　實(shí)驗(yàn)裝置及程序
2. 2. 1　大鼠在新穎環(huán)境中活動(dòng)量測(cè)定　采用40cm(長(zhǎng)) ×40cm(寬) ×35cm(高)的黑色有機(jī)玻璃運(yùn)動(dòng)箱進(jìn)行大鼠精神興奮性運(yùn)動(dòng)行為的測(cè)定。箱體四壁為磨砂面,底板為大小為1cm×1cm的柵格底面。動(dòng)物在動(dòng)物房適應(yīng)1周。正式實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后,將動(dòng)物置于**進(jìn)入的運(yùn)動(dòng)箱中,考察大鼠在60分鐘內(nèi)的自發(fā)活動(dòng)量(根據(jù)攝像頭與監(jiān)測(cè)箱的距離和監(jiān)
測(cè)視野大小計(jì)算,每4個(gè)像素為1cm,以下皆以像素?cái)?shù)計(jì)算動(dòng)物活動(dòng)量)。根據(jù)此活動(dòng)量,將高于和低于活動(dòng)量中位數(shù)的50%大鼠定義為高運(yùn)動(dòng)性大鼠(HR)和低運(yùn)動(dòng)性大鼠(LR)。上述將動(dòng)物按照50%為界,定義為HR和LR大鼠,并研究動(dòng)物此種先天行為特征及其個(gè)體差異與成癮行為效應(yīng)關(guān)系的分類方法,已得到多數(shù)研究者的認(rèn)可。
2. 2. 2　大鼠行為敏感化及條件性行為敏感化測(cè)定裝置同“大鼠在新穎環(huán)境中活動(dòng)量測(cè)定裝置”。測(cè)定分為行為敏感化形成的測(cè)試階段和條件性行為敏感化形成的測(cè)試階段。將HR和LR大鼠各分為3組,就給予**和環(huán)境是否匹配,將動(dòng)物分成6組,分別為HR_匹配組(n=6),LR_匹配組(n=7),HR_非匹配組(n=7),LR_非匹配組(n=7), HR_對(duì)
照組(n=8),LR_對(duì)照組(n=8)。
　　正式實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后,從第1天到第5天為行為敏感化測(cè)試階段。對(duì)于匹配組動(dòng)物,每天上午10點(diǎn),在測(cè)試箱中給予**,測(cè)試其60分鐘內(nèi)的活動(dòng)量。晚8點(diǎn),匹配組動(dòng)物在動(dòng)物房飼養(yǎng)籠中給予鹽水。對(duì)于非匹配組動(dòng)物,上午10點(diǎn)在測(cè)試活動(dòng)箱中給予鹽水,測(cè)試其60分鐘內(nèi)的活動(dòng)量。晚8點(diǎn),在動(dòng)物房飼養(yǎng)籠中給予**。對(duì)照組動(dòng)物,上午10點(diǎn)在測(cè)試活動(dòng)箱中給予鹽水,測(cè)試動(dòng)物在60分鐘內(nèi)的活動(dòng)量。晚8點(diǎn),動(dòng)物在動(dòng)物房飼養(yǎng)籠中給予鹽水。
　　實(shí)驗(yàn)第6天, 6組動(dòng)物分別給予和訓(xùn)練階段相同容量的生理鹽水注射,測(cè)試大鼠在60分鐘內(nèi)在測(cè)試箱中的活動(dòng)量,此活動(dòng)量為動(dòng)物條件性行為敏感化的表達(dá)。
2. 3　數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
　　應(yīng)用two- wayANOVA重復(fù)測(cè)量方式統(tǒng)計(jì)HR和LR匹配大鼠在連續(xù)測(cè)量下形成的行為敏感化效應(yīng),應(yīng)用此統(tǒng)計(jì)方法考察從第1天到第2天給藥,從第5天給予**到第6天給予鹽水引起的動(dòng)物活動(dòng)量的改變。應(yīng)用單變量方差分析(one- wayANO2VA)方式考察在條件測(cè)試日(第6天)橫斷面上,匹配組、非匹配組、對(duì)照組動(dòng)物的精神興奮性差異。應(yīng)
用單變量方差分析(one- wayANOVA)方式,統(tǒng)計(jì)在條件測(cè)試日(第6天)橫斷面上,在HR和LR內(nèi)部,匹配、非匹配、對(duì)照組動(dòng)物的精神興奮性運(yùn)動(dòng)的差異。

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