高壓液相色譜儀維護(hù)保養(yǎng)知識(shí)保養(yǎng)事項(xiàng)
1、色譜柱長(zhǎng)時(shí)間不用，存放時(shí)，柱內(nèi)應(yīng)充滿(mǎn)溶劑，兩端封死（如ACN適于反相色譜柱，正相色譜柱用相應(yīng)的有機(jī)相）
2、對(duì)于手動(dòng)進(jìn)樣器，當(dāng)使用緩沖溶液時(shí)，要用水沖洗進(jìn)樣口，同時(shí)搬動(dòng)進(jìn)樣閥數(shù)次，每次數(shù)毫升。
3、流動(dòng)相使用前必須過(guò)濾，不要使用多日存放的蒸餾水（易長(zhǎng)菌）。
維護(hù)知識(shí)問(wèn)答
1、為什么溶劑和樣品要過(guò)濾?
溶劑和樣品過(guò)濾非常重要，它會(huì)對(duì)色譜柱、儀器起到保護(hù)作用，消除由于污染對(duì)分析結(jié)果的影響。)
色譜柱：由于填料顆粒很細(xì)，色譜柱內(nèi)腔很小，溶劑和樣品中的細(xì)小顆粒會(huì)使色譜柱和毛細(xì)管容易堵塞。
儀器：溶劑和樣品中的細(xì)小顆粒會(huì)增加進(jìn)樣閥的堵塞和磨損，同時(shí)也會(huì)增加泵頭內(nèi)的藍(lán)寶石活塞桿和活塞的磨損。
2、HPLC用緩沖鹽時(shí),由于泵頭內(nèi)的緩沖鹽溶液存在高壓析鹽現(xiàn)象,析出的細(xì)小鹽粒非常堅(jiān)硬,它附著在藍(lán)寶石活塞桿上,隨著藍(lán)寶石活塞桿的往復(fù)運(yùn)動(dòng),容易產(chǎn)生劃痕,并磨損密封墊,造成漏液等故障現(xiàn)象。
3、流動(dòng)相使用前為什么要脫氣？
流動(dòng)相使用前必須進(jìn)行脫氣處理，以除去其中溶解的氣體（如O2），以防止在洗脫過(guò)程中當(dāng)流動(dòng)相由色譜柱流至檢測(cè)器時(shí)，因壓力降低而產(chǎn)生氣泡。氣泡會(huì)增加基線的噪音，造成靈敏度下降，甚至無(wú)法分析。溶解的氧氣還會(huì)導(dǎo)致樣品中某些組份被氧化，柱中固定相發(fā)生降解而改變柱的分離性能。
4、常用的脫氣方法比較：
氦氣脫氣法：利用液體中氦氣的溶解度比空氣低，連續(xù)吹氦脫氣，效果較好，但成本高。
加熱回流法：效果較好，但操作復(fù)雜，且有毒性揮發(fā)污染。
抽真空脫氣法：易抽走有機(jī)相。
超聲脫氣法：流動(dòng)相放在超聲波容器中，用超聲波振蕩10-15min，此法效果*差
5、如何防止溶劑瓶?jī)?nèi)溶劑過(guò)濾器的堵塞，以及堵塞后的處理？
溶劑的質(zhì)量或污染以及藻類(lèi)的生長(zhǎng)會(huì)堵塞溶劑過(guò)濾器，從而影響泵的運(yùn)行，尤其水溶液或磷酸鹽緩沖液（PH=4—7）。以下幾種方法可以有效防止溶劑瓶?jī)?nèi)溶劑過(guò)濾器的堵塞。
A：請(qǐng)嚴(yán)格執(zhí)行溶劑過(guò)濾。
B：請(qǐng)勿使用多日存放的蒸餾水及磷酸鹽緩沖液!
C：如果應(yīng)用許可，可在溶劑中加入0.0001---0.001M的疊氮化鈉.
D:在溶劑瓶?jī)?nèi)溶劑的上方小流量連續(xù)吹氬氣,以隔絕空氣。
E：避免使溶劑瓶暴露在直射陽(yáng)光下，盡量使用琥珀色的溶劑瓶盛放水溶液或磷酸鹽緩沖液。堵塞后的處理法方法：將過(guò)濾頭從組件中取下，在濃硝酸（35%）中浸泡1h，然后用二次蒸餾水沖洗干凈并超聲處理。
6、泵如何維護(hù)？
泵給色譜柱提供穩(wěn)定、無(wú)脈動(dòng)、流量準(zhǔn)確的流動(dòng)相，及時(shí)合理的維護(hù)非常重要。A：流動(dòng)相使用前請(qǐng)必須脫氣、過(guò)濾。
B：使用緩沖鹽時(shí)，關(guān)機(jī)前，用 100%的水沖洗系統(tǒng)20分鐘，然后用有機(jī)溶劑沖洗系統(tǒng)10分鐘（如甲醇），然后關(guān)泵，（適于反相色譜柱）。[正相色譜柱用適當(dāng)?shù)娜軇_洗]
7、手動(dòng)進(jìn)樣閥需做那些維護(hù)，使用時(shí)要注意什么？
對(duì)于手動(dòng)進(jìn)樣器，當(dāng)使用緩沖溶液后，或者進(jìn)濃度差異比較大的樣品時(shí)要用專(zhuān)用工具而不是用帶針頭的注射器沖洗進(jìn)樣口，同時(shí)搬動(dòng)進(jìn)樣閥數(shù)次，每次數(shù)毫升。
注意事項(xiàng)：)
●安裝時(shí)六通閥的5，6出口要與注射器在同一水平線上，以防止虹吸現(xiàn)象的發(fā)生，導(dǎo)致進(jìn)樣量的重復(fù)性變異。
●進(jìn)樣量的多少要根據(jù)定量管的LOOP體積決定。
當(dāng)樣品量少時(shí)：進(jìn)樣體積由注射器的進(jìn)樣體積決定，但*大進(jìn)樣體積要小于1/2loop體積。
當(dāng)樣品量較多時(shí)：進(jìn)樣體積由定量管的體積決定，為保證樣品完全把定量管的流動(dòng)相置換干凈，需注射5—6倍的LOOP體積。
●要使用專(zhuān)用的液相注射器進(jìn)樣，**不可以用氣相的注射器。
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