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紫外分光光度法原理

發(fā)布時(shí)間:2014-09-15

紫外分光光度法原理及紫外分光光度法測(cè)量蛋白質(zhì)含量原理,上海旦鼎技術(shù)人員將為您做詳細(xì)講解,希望能對(duì)您有幫助,歡迎瀏覽以下詳細(xì)內(nèi)容:
一、紫外分光光度法原理
紫外分光光度法的原理是根據(jù)物質(zhì)分子對(duì)波長(zhǎng)為200-760nm這一范圍的電磁波的吸收特性所建立起來(lái)的一種定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法。操作簡(jiǎn)單、**度高、重現(xiàn)性好。波長(zhǎng)長(zhǎng)(頻率?。┑墓饩€能量小,波長(zhǎng)短(頻率大)的光線能量大。分光光度測(cè)量是關(guān)于物質(zhì)分子對(duì)不同波長(zhǎng)和特定波長(zhǎng)處的輻射吸收程度的測(cè)量。
       紫外分光光度法
二、紫外分光光度法測(cè)量蛋白質(zhì)含量原理
1、紫外吸收光譜是基于物質(zhì)的生色團(tuán)和助色團(tuán)的特性對(duì)紫外光譜的吸收,可用于物質(zhì)的鑒定和結(jié)構(gòu)分析。
2、參與蛋白質(zhì)組成的20種氨基酸中色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)的R基團(tuán)中含有苯環(huán)共軛雙鍵系統(tǒng),在紫外光區(qū)(220-300nm)顯示特征的吸收譜帶,*大光吸收(lmax)分別為279、278、和259nm。由于大多數(shù)蛋白質(zhì)都含有這些氨基酸殘基,因此用紫外分光光度法可測(cè)定蛋白質(zhì)含量。
因此可以用標(biāo)準(zhǔn)曲線法在280nm測(cè)樣品吸光度,求得蛋白含量。
       《
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