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技術(shù)文章

肝素鈉分析專用柱--南京旭??儀器
肝素鈉分析專用柱--南京旭析儀器
肝素鈉分析柱
 
柱子使用：
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先不接柱子，將高效液相儀器（Aglient1200）系統(tǒng)完全替換成所用流動相，然后按照色譜柱上流動相流動方向安裝柱子，開啟液相流速，以流速0.5mL/min，用初始梯度流動相平衡柱子2.0 h，進(jìn)樣前將流速降到0.22 mL/min，至基線走平，進(jìn)樣；
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再次進(jìn)樣之前需用0.5 mL/min的流速平衡柱子0.5 h，至基線走平。
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如果用自動進(jìn)樣連續(xù)進(jìn)樣，可按照以下梯度平衡柱子進(jìn)
柱子使用后處理：
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高效液相色譜儀用去離子水沖洗干凈后，用去離子水以0.5mL/min的流速沖洗柱子，至流出液以pH試紙測試呈中性（通常需沖洗兩個小時以上），將柱子卸下，堵上堵頭，放室溫存放
容易出現(xiàn)的幾種問題
一：基線不穩(wěn)，重現(xiàn)性不好
解決：柱子未平衡好，充分平衡柱子
初次進(jìn)樣，平衡時間通常需要以0.5 mL/min平衡2 h?？蛇M(jìn)樣前先走一針空白梯度，再回到初始梯度平衡，進(jìn)樣。若柱子尚未平衡好，出峰會出現(xiàn)異常的情況，如保留時間不重現(xiàn)，基線不穩(wěn)，基線漂移不重現(xiàn)等。
下圖為平衡正常的柱子和未平衡好的柱子走的圖譜
二：基線漂移過高
解決：不同的高氯酸鈉的導(dǎo)致流動相的差異
不同廠家生產(chǎn)的高氯酸鈉可能由于純度不同，導(dǎo)致基線的漂移差異很大，實(shí)驗(yàn)室使用過的國藥、阿拉丁、上海凌峰的試劑，上海凌峰的試劑做出的圖譜基線較平緩。
下圖為相同條件下使用阿拉丁的和上海凌峰的高氯酸鈉的出峰情況。
三：對照品進(jìn)樣出現(xiàn)鬼峰
解決：樣品自身降解產(chǎn)生的雜質(zhì)峰
系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在對照品溶液中仍會有雜峰出現(xiàn)，保留時間為20 min，為對照品中肝素鈉和多硫酸軟 骨素降解產(chǎn)生的物質(zhì)。
下圖1為同一份肝素鈉對照品溶液在不同保存環(huán)境下的出峰情況，圖2為放置時間過久的多硫酸軟骨素。

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