應(yīng)用管碟法測(cè)定****的抑菌效果（***效價(jià)）應(yīng)用原理****從牛津杯底部向瓊脂培養(yǎng)基擴(kuò)散滲透，通過(guò)對(duì)試驗(yàn)菌的抑殺作用而影響**生長(zhǎng)繁殖，使菌落形成抑菌圈，依抑菌圈的大小確定****能力的強(qiáng)弱。通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察****作用效果，熟練掌握管碟法體外測(cè)定**的**活性、應(yīng)用管碟法測(cè)定****的抑菌效果（***效價(jià)）【材料】
1. 菌種：金黃色葡萄球菌，培養(yǎng)16~18**湯菌液；大腸桿菌O78，培養(yǎng)16~18**湯菌液。
2. 藥品：青霉素G鈉、恩諾沙星、硫酸慶大霉素、氟苯尼考。
3. 器材：生化培養(yǎng)箱、電熱蒸汽**器、水浴鍋、**肉湯瓊脂培養(yǎng)基、酒精燈、平皿、吸管、牛津杯（標(biāo)準(zhǔn)不銹鋼管）、鑷子、滴管、記號(hào)筆、L形玻璃棒、游標(biāo)卡尺等。
應(yīng)用管碟法測(cè)定****的抑菌效果（***效價(jià)）【實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)步驟】
1. 藥液的配制與肉湯營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板的制備。
⑴ 按要求準(zhǔn)確稱取一定量的****，用無(wú)菌蒸餾水配制成所需濃度的溶液。
⑵ 將**肉湯瓊脂培養(yǎng)基溶化后取15ml倒入**培養(yǎng)皿內(nèi)，放置一定時(shí)間凝固，作為底層培養(yǎng)基。
2. 用無(wú)菌吸管吸取試驗(yàn)菌的培養(yǎng)液0.1ml，滴在平皿底層培養(yǎng)基上，用無(wú)菌L形玻璃棒將菌液涂勻。
3. 在平皿底部作好相應(yīng)標(biāo)記，用無(wú)菌鑷子在每個(gè)平皿中等距離放置4個(gè)牛津杯。
4. 用滴管分別將藥液滴加到牛津杯中，以滴滿為度，蓋上平皿蓋。然后將滴加藥液的平皿放置在玻璃板上，再水平送入恒溫箱內(nèi)，37℃下培養(yǎng)16～24h。
5. 用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈直徑，判定******作用的強(qiáng)弱。見圖。
應(yīng)用管碟法測(cè)定****的抑菌效果（***效價(jià)）【注意事項(xiàng)】
1. 應(yīng)在無(wú)菌條件下操作，試驗(yàn)完畢后及時(shí)**處理，防止散毒。
2. 牛津杯放入培養(yǎng)基表面時(shí)，既要確保牛津杯底端與培養(yǎng)基表面緊密接觸，以防藥液從接觸面漏出，又要防止牛津杯陷入平皿底部。
3. 加入牛津杯的藥液量應(yīng)相同。
圖 管碟法測(cè)定的操作過(guò)程
【實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)結(jié)果】見表。
表管碟法測(cè)定****的抑菌效果
| 菌種 | ** | 濃度 （μg/ml或IU/ml） | 抑菌圈直徑（mm） | 判定結(jié)果 |
| 金黃色 葡萄球菌 | 青霉素G鈉 | | | |
| 恩諾沙星 | | | |
| 硫酸慶大霉素 | | | |
| 氟苯尼考 | | | |
| 大腸桿菌 | 青霉素G鈉 | | | |
| 恩諾沙星 | | | |
| 硫酸慶大霉素 | | | |
| 氟苯尼考 | | | |
【討論與作業(yè)】利用****作用機(jī)制分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，闡述其臨床應(yīng)用的指導(dǎo)意義。
附：1. 藥敏試驗(yàn)判定標(biāo)準(zhǔn)
表****的抑菌效果判定標(biāo)準(zhǔn)
| 抑菌圈直徑（mm） | 敏感性 |
| <9 | 耐藥 |
| 9~11 | 低度敏感 |
| 12~17 | 中度敏感 |
| >18 | 高度敏感 |
2. 肉湯瓊脂培養(yǎng)基制法
牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化鈉5.0g、瓊脂2.0g、蒸餾水1000.0ml，加熱溶解后，調(diào)節(jié)pH至7.4~7.6，煮10min，冷卻過(guò)濾，103.4kPa壓力**15min備用。
