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技術(shù)文章

流式細胞儀的參數(shù)測量
流式細胞儀可以多參數(shù)測量的同時,信息主要來自特定的熒光信號和熒光散射信號。
測量進行了測量面積,測量面積光和噴氣孔板流激光束垂直相交點。
流體流動在單個細胞的中心通過測量激光照射區(qū)域的立體角是2π,整個空間的散射光,散射光在同一波長和入射光的波長。
散射光強度及其空間分布和細胞大小、形狀、等離子體膜和細胞密切相關(guān),因為這些參數(shù)的內(nèi)部結(jié)構(gòu)和細胞生物學的光反射和折射的光學特性。
沒有遭受任何損壞的細胞有散射光的特點,因此可以使用不同的散射光信號分析的活細胞染色和整理,不
通過固定和染色處理細胞而改變的光學特性,其散射光信號,當然,不同于活細胞。
散射光不僅是相關(guān)的細胞為中心的散射參數(shù),也與散射角,并收集散射光的非生物因素,如固體角。
常用于流式細胞術(shù)測量方向的兩種散射光散射測量:(1)角散射角(0)(FSC);
(2)側(cè)散射(SSC),也被稱為90角散射。
這時什么角指的是激光束的方向,收集散射光信號的光電倍增管之間的夾角約為軸向方向。
一般來說,前散射光強度的角度和細胞與細胞的大小相同的組的提高而增大細胞面積;
活細胞的球形實驗表明,范圍內(nèi)的小立體角,基本上成線性關(guān)系橫截面積的大小;
對于復雜形狀是取向的細胞可能差異很大,尤其需要注意。
側(cè)向散射光測量主要用于檢索細胞內(nèi)部信息的精細結(jié)構(gòu)的粒子屬性。
側(cè)向散射光與細胞的形狀和大小,但它是更敏感的折射率細胞膜,細胞質(zhì)、核膜,也可以大顆粒的細胞質(zhì)是敏感的反映。