Westernblot 檢測化學發(fā)光成像的特點
Westernblot檢測化學發(fā)光成像的特點:Westernblot是蛋白質研究中*常用的一個手段,大部分Westernblot顯色底物是化學發(fā)光底物,*后的顯示方法有膠片(壓片)法和化學發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)。
膠片法需要暗房、X膠片,配置顯影液、定影液、然后進行壓片、顯影、定影,要得到一個比較理想的圖片往往需要重復壓片幾次操作非常繁瑣而且需要耗材。
化學發(fā)光成像凝膠系統(tǒng)超越了膠片法,不需要暗房、壓片、顯影、定影,關鍵的條帶不會因為曝光不足或者曝光過度而丟失。而且該方法無耗材,圖片結果為電子文檔,方便存檔和長期保存。
化學發(fā)光成像系統(tǒng)與普通凝膠成像系統(tǒng)相比,其特點體現(xiàn)在:
1、高靈敏度CCD芯片:采用化學發(fā)光成像系統(tǒng)通用的高靈敏度CCD芯片。
2、高動態(tài)范圍:CCD芯片選定后,相機的動態(tài)范圍就有AD轉換器決定,國際知名的化學發(fā)光成像系統(tǒng)均采用了16bitAD轉換,而12bit的相機用于凝膠成像沒有問題,用于化學發(fā)光就不合適了。
3、低噪音:相機產生的噪音有兩種,分別是熱噪音和讀出噪音,在降低熱噪音方面,經過多級半導體制冷,使得CCD芯片溫度低于環(huán)境溫度50℃左右,且溫度可控,控溫精度為±0.2℃,并可控制半導體制冷開關和風扇開關;在降低讀出噪音方面,通常采用低噪音的16位A/D轉換,同時反復優(yōu)化電路設計,降低噪音。