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色譜柱常見問題問題指南及維護方法
色譜柱常見問題問題指南及維護方法
1、色譜柱污染
    色譜柱污染會引起保留時間漂移。HPLC色譜柱是非常有效的吸附性過濾器，它可以過濾并吸附流動相攜帶的任何物質(zhì)。污染源可能是：流動相本身，流動相容器，連接管、泵、進樣器和儀器密封墊，以及樣品等。
樣品中如果存在色譜柱上保留很強的組分，就可能使保留時間漂移。通常樣品中的強保留組分具有較高的分子量，在此情況下，保留時間漂移的同時或其后會有反壓的增加?？梢酝ㄟ^使用固相提取等樣品前處理方法來去除樣品基質(zhì)的影響。
避免色譜柱污染*簡單的方法是防患于未然。相比之下，找到問題的所在并設計有效的清洗步驟以去除污染物要困難的多。通常使用在給定色譜條件下的強溶劑，但并非所有污染物都可以在流動相中溶解。
使用保護柱是個非常有效的方法。反沖色譜柱僅是不得已時采用的辦法。

2、色譜柱平衡
    如果我們觀察到保留時間漂移，首先應考慮色譜柱是否已用流動相完全平衡。通常平衡需要10~20個柱體積的流動相。但如果在流動相中加入少量添加劑則需要相當長的時間來平衡色譜柱。需要柱子的充分平衡，然后才能對HPLC進行檢定。

3、流動相有機溶劑
HPLC分析總要求使用HPLC純的試劑，關(guān)鍵是兩點：純度高、紫外吸收小。純度高，是希望沒有雜質(zhì)干擾HPLC分析；不會有金屬離子損害純度為99.99%以上的高純度硅膠基質(zhì)?？梢酝ㄟ^重蒸分析純?nèi)軇?；或濾膜過濾，并定期把前置的過濾頭取下，放稀硝酸里清洗，再用純水洗至中性。
流動相有機溶劑可能影響HPLC的檢測限。http://www.ba17.com/LC-Column/Category380.aspx

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