豬口蹄疫O型IgG抗體診斷試劑盒（酶免法） 豬口蹄疫O型IgG抗體診斷試劑盒（酶免法） 豬口蹄疫O型IgG抗體診斷試劑盒（酶免法）

一、產(chǎn)品名稱(chēng)

通用名：豬口蹄疫病毒O型IgG抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)**法）

英文名：Diagnostic Kit for Antibodies to Porcine foot and mouth disease virus (ELISA)

二、包裝規(guī)格 96T×1/盒、96T×2/盒

三、預(yù)期用途 口蹄疫是由口蹄疫病毒（FMDV）感染引起的偶蹄動(dòng)物共患的急性、熱性、接觸性傳染病。在豬的預(yù)防**工作中，*值得關(guān)注的就是強(qiáng)化**的接種時(shí)機(jī)問(wèn)題。在過(guò)高的抗體水平進(jìn)行**，過(guò)高的抗體水平還會(huì)中和疫苗，影響疫苗的**效果，導(dǎo)致**失??；在較低的抗體水平進(jìn)行**，又會(huì)出現(xiàn)抗體保護(hù)真空期，威脅豬的健康。

本試劑盒用于檢測(cè)豬血清、血漿中豬口蹄疫病毒O型抗體，可用于豬口蹄疫病毒O型疫苗**效果評(píng)價(jià)。

四、試劑盒原理

本試劑盒系由預(yù)包被豬口蹄疫病毒O型（OZK/93株+OS/99株）VP1表位多肽抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)**法（ELISA）原理檢測(cè)豬血清、血漿樣本中豬口蹄疫病毒O型抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后若樣品中含有豬口蹄疫病毒O型抗體，則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標(biāo)記物，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有豬口蹄疫病毒O型抗體。

五、試劑盒組成

酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、底物液A、底物液B、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照

六、儲(chǔ)存及有效期

于2～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月。

包被板開(kāi)封后請(qǐng)于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個(gè)月。

七、適用儀器 含450nm、630nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀，37℃恒溫設(shè)備，可調(diào)微量移液器

操作步驟;

一、樣品準(zhǔn)備

1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無(wú)溶血、無(wú)污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長(zhǎng)期需置-20℃保存。

2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋?zhuān)ㄈ?μl血清加入195μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

二、檢驗(yàn)方法

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。

2.取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對(duì)照1孔、陰性/陽(yáng)性對(duì)照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。

5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。

7.洗滌，同步驟5。
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8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。

9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(可用630nm作參比波長(zhǎng)）測(cè)定各孔吸光值（A值）。