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PCR擴(kuò)增儀操作過程
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PCR擴(kuò)增儀操作過程
　　PCR用于擴(kuò)增一小段已知的DNA片斷，可能是單個(gè)基因，或者僅僅是某個(gè)基因的一部分。與活體生物不同的是，PCR只能復(fù)制很短的DNA片斷，通常不超過10kbp。DNA是雙鏈分子，因此用互補(bǔ)DNA雙鏈的構(gòu)造單位(核苷酸)來度量其大小，單位為堿基對(duì)（base pair, bp）。某些特定的方法可以擴(kuò)增40kbp左右的片斷，但是這種大小與真核細(xì)胞的染色體DNA相比仍然是很少的。例如，人的體細(xì)胞DNA含有大約30億個(gè)堿基對(duì)。 目前應(yīng)用的PCR反應(yīng)需要幾個(gè)基本組成： 　　DNA模板（template），含有需要擴(kuò)增的DNA片斷。 　　2個(gè)引物（primer），決定了需要擴(kuò)增的起始和終止位置。（見下面引物一節(jié)） 　　DNA聚合酶（polymerase），復(fù)制需要擴(kuò)增的區(qū)域。 　　脫氧單核苷酸（dNTP），用于構(gòu)造新的互補(bǔ)鏈。 　　緩沖體系，提供適合聚合酶行使功能的化學(xué)環(huán)境。 　　PCR反應(yīng)在熱循環(huán)設(shè)備中進(jìn)行。PCR儀可以將反應(yīng)管加熱或冷卻到每步反應(yīng)所需的**的溫度。為防止反應(yīng)體系中液體產(chǎn)生蒸氣，通常在反應(yīng)管上加蓋加熱的蓋子(比加熱板溫度來的高)，或者在反應(yīng)體系表面加入一層石蠟油。