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高壓勻漿器的幾種細胞破碎方法
                                           高壓勻漿器的幾種細胞破碎方法
  
   研磨是常用的一種方法，它將細胞懸浮液與玻璃小珠，石英砂或氧化鋁一起快速攪拌或研磨，使達到細胞的某種程度破碎。這些裝置的主要缺點是在破碎期間樣品溫度迅速升高，通過用二氧化碳來冷卻容器可得到部分解決。

　　X-press法

　　一種改進的高壓方法是將濃縮的菌體懸浮液冷卻至-25C至-30C形成冰晶體，利用500MPa以上的高壓沖擊，冷凍細胞從高壓閥小孔中擠出。細胞破碎是由于冰晶體的磨損，包埋在冰中的微生物的變形所引起的。該法的優(yōu)點是適用的范圍廣，破碎率高，細胞碎片的粉碎程度低以及活性的保留率高，該法對冷凍—融解敏感的生化物質不適用。

　　超聲波法

　　細胞的破碎是由于超聲波的空穴作用，從而產生一個極為強烈的沖擊波壓力，由它引起的粘滯性旋渦在介質中的懸浮細胞上造成了剪切應力，促使細胞內液體發(fā)生流動，從而使細胞破碎。對于不同菌種的發(fā)酵液，超聲波處理的效果不同，桿菌比球菌易破碎，革蘭氏陰性菌細胞比革蘭氏陽性菌細胞容易破碎，對酵母菌的效果級差。該法不適于大規(guī)模操作，因為放大后，要輸入很高的能量來提供必要的冷卻，這是困難的。

　　酶解法

　　利用酶反應，分解破壞細胞壁上特殊的鍵，從而達到破壁的目的。優(yōu)點：專一性強，發(fā)生酶解的條件溫和，缺點:酶水解費用較貴，一般只適用于小規(guī)模的實驗室研究。溶菌酶是應用*多的酶，它能專一地分解細胞壁上糖蛋白分子的α-1，4糖苷鍵，使脂多糖解離，經溶菌酶處理后的細胞移至低滲溶液中使細胞破裂。

　　自溶作用

　　是酶解的另一種方法，所需溶胞的酶是由微生物本身產生的。影響自溶過程的因素有溫度，時間,pH緩沖液濃度，細胞代謝途徑等。自溶法在一定程度上能用于工業(yè)規(guī)模，但是，對不穩(wěn)定的微生物容易引起所需蛋白質的變性，自溶后的細胞培養(yǎng)液過濾速度也會降低。

　　滲透壓沖擊

　　是較溫和的一種破碎方法，將細胞放在高滲透壓的介質中(如一定濃度的甘油或蔗糖溶液)，入達到平衡后，介質被突然稀釋，或者將細胞轉入水或緩沖液中，由于滲透壓的突然變化，水迅速進入細胞內，引起細胞壁的破裂。滲透壓沖擊的方法僅對細胞壁較脆弱的菌，或者細胞壁預先用酶處理,或合成受抑制而強度減弱時才是合適的。

　　凍結融化法

　　將細胞放在低溫下突然冷凍和室溫下融化，反復多次而達到破壁作用。對于細胞壁較脆弱的菌體，可采用此法。但通常破碎率很低即使反復循環(huán)多次也不能提高收率。另外，還可能引起對凍融敏感的某些蛋白質的變性。

　　干燥法

　　可采用空氣干燥，真空干燥，噴霧干燥和冷凍干燥等。空氣干燥主要適用于酵母菌。真空干燥適用于**的干燥。冷凍干燥適用于較不穩(wěn)定的生化物質。干燥法條件變化較劇烈，容易引起蛋白質或其它組織變性。