甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂
(Toluidine Blue-DNA Agar)
用 途:
用于金黃色葡萄球菌的耐熱核酸酶的試驗(yàn)。 (SN 0172-92)。
原 理:
具有脫氧核糖核酸酶的**分解培養(yǎng)基中的脫氧核糖核酸(DNA),使DNA長(zhǎng)鏈水解成數(shù)個(gè)單核苷酸的寡核苷酸短鏈,使指示劑甲苯胺藍(lán)作用變成粉紅色;氯化鈣提供陽(yáng)離子作為激活劑;氯化鈉維持均衡的滲透壓;三羥甲基氨基甲烷為緩沖劑;瓊脂為培養(yǎng)基的凝固劑。
配方(每升):
脫氧核糖核酸(DNA)
0.3g
氯化鈣
0.0011g
氯化鈉
10g
甲苯胺藍(lán)
0.083g
三羥甲基氨基甲烷
6.1g
瓊脂
*終pH 9.0±0.2
使用方法:
1. 稱取本品26.5g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,115℃高壓**15min(即用可不需**),備用。
2. 載玻片的制備:取3mL甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂平鋪于在載波片上制成標(biāo)本,待瓊脂凝固后,在瓊脂上打成直徑2mm的小洞(每個(gè)載玻片10-12個(gè)),抽出小洞中的瓊脂塊。
3. 從Baird-parker平板挑一個(gè)可疑單菌落接種普通肉湯培養(yǎng)基中,36±1℃培養(yǎng)20h~24h后,經(jīng)過(guò)100℃沸水煮15min,取0.01mL接種所制備的載玻片上小洞,于35℃培養(yǎng)4h后,觀察結(jié)果。
質(zhì)量控制:
質(zhì)控菌株接種后,于35℃培養(yǎng)4h結(jié)果如下:
菌 名
菌 號(hào)
培養(yǎng)特征
金黃色葡萄球菌
ATCC6538
粉紅色圈
表皮葡萄球菌
CMCC(B)26069
無(wú)粉紅色圈
貯 存:2~8℃避光貯存
貯 存 期:三年
規(guī) 格:100g
粵公網(wǎng)安備 44011602000411號(hào)