品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基（遠(yuǎn)藤瓊脂培養(yǎng)基）
(Endo Agar)
用 途：
用于水中大腸菌群的分離或確證試驗。 (GB/T8538-2008和GB5750.12—2006)。
原 理：
乳糖發(fā)酵的**產(chǎn)生乙醛，在存在堿性品紅的情況下乙醛與亞硫酸鈉結(jié)合形成紅色菌落，快速發(fā)酵乳糖的**產(chǎn)生金屬光澤，不發(fā)酵乳糖的**形成無色透明的菌落。
蛋白胨、酵母膏粉、牛肉膏粉提供碳氮源、維生素和礦物質(zhì)；乳糖為可發(fā)酵的糖類；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；磷酸氫二鉀為緩沖劑；亞硫酸鈉能將堿性品紅還原，使其褪色，發(fā)酵乳糖的**產(chǎn)生乙醛，與亞硫酸鈉和堿性品紅生成紅色菌落。
配方（每升）：
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蛋白胨
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10g
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酵母膏粉
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5g
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牛肉膏粉
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5g
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乳糖
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10g
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瓊脂
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15g
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磷酸氫二鉀
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3.5g
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無水亞硫酸鈉
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5g
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堿性品紅
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1g
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*終pH 7.2±0.2
使用方法：
1、 稱取本品54.5g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，115℃高壓**20min，冷至50℃左右，傾注無菌平皿，備用。
2、 濾膜**：將孔徑為0.45μm的濾膜放入燒杯中，加入蒸餾水或去離子水，置于沸水浴中煮沸**三次，每次15min。前兩次煮沸后需更換水洗滌2—3次，以除去殘留溶劑。
3、 濾器**：用點燃的酒精棉球，火焰**。也可用121℃高壓**20min。
4、 過濾水樣：用無菌鑷子夾取**濾膜邊緣部分，將粗糙面向上，貼放在已**的濾床上，固定好濾器，將100mL水樣（如水樣含菌較多，可減少過濾水樣量，或?qū)⑺畼酉♂專┳⑷霝V器中，打開濾器閥門，負(fù)0.5大氣壓下抽濾。
5、 培養(yǎng)：水樣抽濾完后，再抽氣約5S，關(guān)上濾器閥門，取下濾器，用**鑷子夾取濾膜邊緣部分，移放在品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上，濾膜截留面向上，濾膜應(yīng)與培養(yǎng)基完全貼緊，兩者間不得留有氣泡，然后將平皿倒置，放入36±1℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)22—24h。
6、 觀察結(jié)果：挑出符合下列特征菌落進行革蘭氏染色、鏡檢。
紫紅色，具有金屬光澤的菌落。
深紅色，不帶或略帶金屬光澤的菌落。
淡紅色，中心色較深的菌落。
質(zhì)量控制：
本培養(yǎng)基傾注平皿待冷卻后呈淺紅色。質(zhì)控菌株接種后。36±1℃培養(yǎng)22—24h，觀察結(jié)果如下表：
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菌 名
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菌 號
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生長狀況
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菌落特征
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大腸埃希氏菌
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ATCC25922
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良好
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紅色，有金屬光澤
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鼠傷寒沙門氏菌
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CMCC(B)50115
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良好
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無色至淡粉紅色
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金黃色葡萄球菌
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ATCC6538
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不長或差
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——
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貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。
規(guī) 格：250g
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