腦—心浸萃瓊脂培養(yǎng)基
(Brain Heart Infusion Agar)
用 途：
廣泛用于霉菌、酵母、**的培養(yǎng)，包括營(yíng)養(yǎng)要求較高的微生物的培養(yǎng)，特別用于礦泉水和城市供水中糞性鏈球菌濾膜法的確證性實(shí)驗(yàn)(GB/T 8538-2008和CJ/T148-2001)。
原 理：
月示胨和腦—心浸粉提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子；葡萄糖可為多種**提供能源；氯化鈉維持均衡的滲透壓；磷酸氫二鈉為緩沖劑。
配方（每升）：
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幼牛腦(提取浸出粉)
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200g
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牛心(提取浸出粉)
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250g
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葡萄糖
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2g
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氯化鈉
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5g
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月示胨
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10g
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磷酸氫二鈉
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2.5g
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瓊脂
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15g
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*終pH7.4±0.2
使用方法：
1. 稱(chēng)取本品51g，加入1000 mL蒸餾水或去離子水，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝試管，121℃**15分鐘，做成斜面培養(yǎng)基。
2. 從濾膜上挑取典型菌落，接種到腦—心浸萃瓊脂培養(yǎng)基斜面上，在35±0.5℃培養(yǎng)24—48 h。
3. 挑取典型培養(yǎng)物到一片清潔的載玻上，加幾滴新鮮的3%的過(guò)氧化氫到載玻片的涂抹菌液上，如果沒(méi)有氣泡發(fā)生，就顯示過(guò)氧化氫酶反應(yīng)為陰性，則菌落可視為糞鏈球菌，就應(yīng)該繼續(xù)如下確證過(guò)程。如果有氣泡發(fā)生，則過(guò)氧化氫酶反應(yīng)為陽(yáng)性，因此菌落不屬于糞鏈球菌確證試驗(yàn)至此即可結(jié)束。
4. 以接種環(huán)從腦-心浸萃瓊脂培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移一典型菌落到腦-心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基內(nèi)，在45℃培養(yǎng)48h。此外也要同時(shí)轉(zhuǎn)移一典型菌落到膽汁液態(tài)培養(yǎng)中，在35℃培養(yǎng)72h。這種培養(yǎng)基是以無(wú)菌的10%牛膽汁加入到60mL無(wú)菌的腦-心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基中面配成。
5. 轉(zhuǎn)移到上述培養(yǎng)之后，若是菌落能得到繁殖，則表示結(jié)果為陽(yáng)性。
6. 計(jì)數(shù)結(jié)果。
菌數(shù)/ 100mL = N / V × 100
N——經(jīng)證實(shí)的糞性鏈球菌菌落數(shù)
V——過(guò)濾的水樣體積（mL）
質(zhì)量控制：
質(zhì)控菌株接種后于35±0.5℃培養(yǎng)24h，結(jié)果如下：
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菌 名
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菌 號(hào)
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生長(zhǎng)狀況
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糞性鏈球菌
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CMCC(B)32223
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良好
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乙型溶血性鏈球菌
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CMCC(B)32210
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良好
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大腸埃希氏菌
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ATCC25922
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良好
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貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。
規(guī) 格：100g
參考文獻(xiàn):
1. CJ/T148-2001 中華人民共和國(guó)城鎮(zhèn)建設(shè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)城市供水水質(zhì)檢驗(yàn)糞性鏈球菌檢測(cè)
2. GB/T 8538-2008 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法
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