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技術(shù)文章

分子雜交原理


分子雜交(簡稱雜交,hybridization)是核酸研究中一項(xiàng)基本的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。
其基本原理就是應(yīng)用核酸分子的變性和復(fù)性的性質(zhì),使來源不同的 DNA(或RNA)片段,按堿基互補(bǔ)關(guān)系形成雜交雙鏈分子(heteroduplex)。雜交雙鏈可以在DNA與DNA鏈之間,也可在RNA與DNA鏈之間形成。核酸分子雜交是基因診斷的基本的方法之一。
它的基本原理是：互補(bǔ)的DNA單鏈能夠在一定條件下結(jié)合成雙鏈，即能夠進(jìn)行雜交。這種結(jié)合是特異的，即嚴(yán)格按照堿基互補(bǔ)的原則進(jìn)行，它不僅能在DNA和DNA之間進(jìn)行，也能在DNA和RNA之間進(jìn)行。因此，當(dāng)用一段已知基因的核酸序列作出探針，與變性后的單鏈基因組DNA接觸時(shí)，如果兩者的堿基完全配對，它們即互補(bǔ)地結(jié)合成雙鏈，從而表明被測基因組DNA中含有已知的基因序列。
由此可見，進(jìn)行基因檢測有兩個必要條件，一是必需的特異的DNA探針；二是必需的基因組DNA。當(dāng)兩者都變性呈單鏈狀態(tài)時(shí)，就能進(jìn)行分子雜交。
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