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技術(shù)文章

凝膠成像系統(tǒng)的基本選購原則
“只選對的，不選貴的”市場上各、各型號的成像儀林林種種，但是從成像原理上可以分成兩大類，分別是拍照成像和掃描成像。拍照成像簡單說就是樣品和相機(jī)的相對位置不動，可以進(jìn)行單次成像或多次成像；掃描成像則是相機(jī)對樣品進(jìn)行局部成像，然后通過樣品或相機(jī)的移動對整個樣品進(jìn)行成像。拍照成像目前主要采用CCD相機(jī)成像，由于可以設(shè)置不同的曝光時間，常被用來進(jìn)行微弱的化學(xué)發(fā)光及生物發(fā)光的成像。而掃描成像則由于精度高、重復(fù)性好被廣泛用于大型樣品以及多通道成像中?？梢哉f，對于大型樣品或多通道應(yīng)用，能選擇掃描成像的，盡量不要選擇拍照成像。原理搞清楚了，選擇起來就簡單了。不同的原理導(dǎo)致了不同應(yīng)用的選擇，所以千萬不要相信什么“全能王”之類的鬼話，沒有任何一款機(jī)器可以通吃所有應(yīng)用領(lǐng)域。
下面就實驗室常見的一些應(yīng)用簡單的說明選擇的依據(jù)：核酸電泳凝膠：一般此類凝膠都采用EB染色、紫外激發(fā)，而且凝膠較小。推薦采用一般的凝膠成像設(shè)備即可完成。蛋白電泳凝膠：一般此類凝膠采用考染或銀染，白光透射成像。對于小型凝膠您可以選擇一般的凝膠成像設(shè)備，但是對于大型凝膠，特別是雙向電泳凝膠，由于CCD拍照成像會有幾何扭曲，而且透鏡效應(yīng)也會導(dǎo)致不同區(qū)域的信號強(qiáng)度差異，另外CCD拍照也無法保證不同凝膠的成像參數(shù)保持一致，因此掃描成像是選擇。轉(zhuǎn)印膜：這個稍微有些復(fù)雜。一般轉(zhuǎn)印膜有比色法顯色、同位素、化學(xué)發(fā)光和熒光等不同檢測手段。比色法顯色就是產(chǎn)生有顏色的條帶或斑點，一般采用普通的凝膠成像設(shè)備即可。同位素可以采用壓膠片曝光的方法，但是費時、費力而且容易過飽和。比較通用的方法是由FujiFilm在1981年發(fā)明的磷屏成像技術(shù)，獲得信號潛影的磷屏通過激光掃描就可以獲取同位素的信號。而化學(xué)發(fā)光是目前常用的蛋白印跡的檢測手段，無疑，冷CCD拍照成像對這種微弱的光信號是合適的。熒光是所有這些檢測手段中令人贊嘆的和有前景的。這不僅僅是因為熒光染料具有寬的動態(tài)范圍，而且還在于它能夠為我們多通路的檢測途徑（同樣適用于凝膠）。當(dāng)然，您可以使用單一熒光檢測，這時您對凝膠成像設(shè)備的要求就包括了新的激光光源和相應(yīng)的濾光片。
如果您是一個主義者，或者您需要對鄰近或重疊的目標(biāo)分子進(jìn)行成像，那么多通道熒光檢測是您的不二之選。這時掃描成像是選擇，這樣選擇不僅僅是因為掃描成像能夠帶來更高的靈敏度和分辨率，更重要的是，不同通道之間沒有幾何扭曲，擬合性好。微孔板及其他特殊需求：對于拍照成像而言，由于幾何扭曲的問題，對微孔板成像就變得比較復(fù)雜了，一般必須一個專用的校正裝置才可完成。當(dāng)然，如果采用掃描成像一般不需要任何額外附件。很多實驗室現(xiàn)在都對小動物成像非常感興趣，然而對小動物進(jìn)行真的不是一件簡單的事，一方面小動物需要進(jìn)行麻醉和固定；另一方面還需要對信號位置進(jìn)行三維定位。因此，能同時功能、代謝和解剖圖像的PET/CT是進(jìn)行這類成像的有力的工具。

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